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【求助】关于荧光素的问题，请高手解答
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哪位高手知道荧光素电化学氧化的产物是什麽？最好附上文献的链接或者文献名称。发文章急等补资料，希望有这方面经验的老师帮助下，万分感谢。对于提供帮助者，奖励40个金币。有效期1周，谢谢。帖子已经发在分析版，金币已经在那里代扣了，请大家去那个页面解答，感谢提供帮助。 附分析那里发帖的页面地址 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1095192 [ Last edited by zhjf on 2008-12-11 at 12:17 ] |
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jayzhou5351
铜虫 (初入文坛)
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2 结果与讨论 2. 1 测定原理 传统的Fenton反应是用 Fe 2 + 2H2 O2体系产生羟自由基。本文研究发现 ,Mn2 + 亦可与 H2 O2作用类似 Fen2 ton反应产生羟自由基 ,产率比 FeSO4还要高 ,其反应原理可类推如下: Mn2 + + H2 O2 → Mn ( Ⅲ) +· OH + OH- Mn ( Ⅲ) + H2 O2 → Mn ( Ⅳ) +· OH + OH- 然后 ,利用羟自由基迅速氧化荧光素钠 ,使荧光素钠的荧光强度显著降低 ,降低程度随羟自由基的增 加而加大 ,从而间接测定羟自由基的产生量。而水果提取物可以部分清除溶液中的羟自由基 ,从而使其荧 光猝灭程度减弱 ,据此可以测定水果抗氧化性。 2. 2 荧光光谱 对各反应体系在500～540 nm范围内进行扫描 ,得发射光谱如图 1。荧光素钠的最大激发波长为 491 nm ,最大发射波长为512 nm ,从曲线1、 2、 3看出 ,单独的 H2 O2或Mn2 + 不与指示剂反应 ,曲线 6 表明同时加 入 H2 O2和Mn2 + 后产生羟自由基氧化指示剂使荧光峰显著下降 ,曲线1、 6的 △F可用于测定羟自由基的产 生量;曲线4、 5表明加入抗氧化剂使与羟自由基反应 ,其荧光强度下降程度减弱 ,而且随抗氧化剂浓度的 增大而增强 ,曲线5、 6的 △F可用于测定清除率。选择491/ 512 nm测定 ,狭缝宽度均选择2. 5 nm。 2. 3 实验条件 2. 3. 1 酸度的影响 强酸性介质中荧光素钠基本无荧光 ,弱酸性介质中荧光素钠的荧光很弱 ,碱性介质 中 ,荧光素钠发强荧光 ,空白和羟自由基体系的 △F受pH值的影响如图 2 所示。可以看出 ,在pH 9. 4～ 10. 8范围内 , △F有较大值 ,碱性太强 △F下降且容易产生浑浊 ,故选用弱碱性介质pH 9. 4 的缓冲溶液。 缓冲溶液用量在0. 1～0. 3 mL 范围内 , △F随其用量增加逐渐增大 ,0. 3 mL 后 , △F逐渐减小 ,本实验选用 缓冲溶液为0. 3 mL。 2. 3. 2 荧光素钠的用量 加入不同体积8 × 10 - 4 g/ L 的荧光素钠溶液 ,按实验方法测定空白体系和· OH 体系的 △F ,结果表明 ,随着荧光素钠用量的加大 , △F增大 ,但当用量大于 0. 6 mL 时 ,空白值超出读数范 围 ,为保证较大灵敏度本实验选用荧光素钠用量为0. 5 mL。 2. 3. 3 MnSO4的用量 按实验方法加入不同体积2. 0 mmol/ L 的MnSO4溶液 ,测定荧光强度 ,发现 0. 3 mL 以内随着MnSO4用量增多 ,· OH体系荧光强度急剧下降 , △F迅速增大 ,在 0. 3 mL 以后荧光强度下降缓 慢 , △F略有增大 ,选用MnSO4溶液为0. 3 mL。 2. 3. 4 过氧化氢用量 用不同体积0. 1 %的 H2 O2溶液按实验方法测定 ,结果表明 ,在0. 5 mL 以内随着 H2 O2用量的增大 , △F显著增大 ,在0. 5 mL 后 △F即缓慢增大。本实验选用 H2 O2溶液为0. 5 mL。 2. 3. 5 反应时间 向荧光素钠溶液中加入缓冲溶液、 MnSO4溶液、 H2 O2溶液、 按实验方法操作 ,结果表明 ,5 min以内荧光强度随时间增大而急剧下降 ,6～20 min范围内基本不变 ,本实验选取7 min。 28 第1期 臧运波等:荧光素钠2Mn2 + 2H2O2体系荧光法测定常见水果的抗氧化活性 第21卷收稿日期: 2003206202 通讯联系人: 张爱梅 第21卷第1期 Vol . 21 No. 1 分 析 科 学 学 报 JOURNAL OF ANALYTICAL SCIENCE 2005年2月 Feb. 2005 文章编号:100626144 (2005) 0120081203 荧光素钠2Mn2 + 2H2O2体系荧光法测定 常见水果的抗氧化活性 臧运波, 张爱梅3 (聊城大学化学化工学院 ,山东 聊城 252059) 摘 要:荧光素钠本身能产生特征荧光 ,其激发波长和发射波长分别为 491 nm 和 512 nm。在碱性介质中 ,Mn2 + 2H2 O2体系产生的羟自由基可以迅速氧化荧光素钠使荧 光猝灭 ,而水果提取物可以部分清除溶液中的羟自由基 ,从而使其荧光猝灭程度减 弱。据此建立了一种测定水果抗氧化性的新方法。测试了9 种常见水果的抗氧化活 性 ,其中桃、 橙子、 香瓜、 香蕉、 西红柿的抗氧化性较强。 关键词:荧光光度法;水果;羟自由基;荧光素钠 中图分类号:O637. 39 文献标识码:A 羟自由基(· OH)是一种氧化能力很强的自由基 ,可以发生电子转移、 夺取氢原子和羟基化等反应 ,可 以使糖类、 氨基酸、 蛋白质、 核酸和脂类都发生氧化遭受损伤和破坏 ,· OH与衰老、 肿瘤、 辐射损伤和细胞 吞噬有关[1 ] 。 对羟自由基的检测已有一些报道[1 - 5 ] ,多是用 Fe 2 + 2H2 O2体系产生羟自由基 ,或用 Cu + 、 Co2 + 代替 Fe 2 + 使灵敏度提高[1 ,2 ] 。本文采用荧光法 ,用 Mn2 + 2H2O2新体系产生羟自由基 ,灵敏度、 稳定性均比上述体系 好 ,建立了荧光法测定羟自由基清除率的新体系。对9种常见水果的消除羟自由基作用进行了研究 ,结果 表明桃、 橙子、 香瓜、 香蕉、 西红柿的抗氧化性较强。本研究对于充分利用丰富的水果资源具有实际意义。 1 实验部分 1. 1 仪器和试剂 LS 255型荧光分光光度计(美国 ,PE公司) 。 MnSO4溶液:2. 0 mmol/ L ;H2 O2溶液:0. 1 %;荧光素钠溶液:8 × 10 - 4 g/ L ;pH 9. 4 的 0. 4 mol/ L NH32NH4Cl 缓冲溶液;抗坏血酸:0. 5 mmol/ L。所用试剂均为分析纯 ,水为二次蒸馏水。 1. 2 实验方法 1. 2. 1 羟自由基的测定 在10 mL 具塞刻度试管中 ,加入8 ×10 - 4 g/ L 的荧光素钠 0. 5 mL ,pH 9. 4 的缓 冲溶液0. 3 mL ,2. 0 mmol/ L 的Mn2 + 溶液0. 3 mL ,0. 1 %的 H2 O2溶液0. 5 mL ,加蒸馏水至刻度 ,混匀。7 min 后 ,以491/ 512 nm测定荧光强度 F ,计算其与空白参比(荧光素钠与缓冲液)荧光强度 Fo之差 △F ,通过测 定· OH形成前后荧光素钠的荧光强度变化 ,测定· OH的产生量。 1. 2. 2 羟自由基清除率的测定 在上述体系中加入一定量的羟自由基清除剂 ,同样操作测定荧光强度 Fs ;荧光素钠和缓冲溶液作为空白体系,其荧光强度为 Fo ;未加清除剂的体系,其荧光强度为 F;则清除率 = ( Fs —F) / ( Fo —F) × 100 %。 1. 2. 3 水果水提取物清除· OH的作用 新鲜水果洗净 ,晾干 ,准确称取 40 g ,加入 200 mL 蒸馏水 ,匀浆 3 min ,过滤 ,离心5 min ,上层清液稀释若干倍后取1 mL 按上述方法进行测定。 182. 4 方法的重现性 按实验方法配制一批产生· OH的溶液进行重现性实验 ,结果见表1。由表可见 ,本方法的相对标准偏 差为1. 34 % ,这表明本方法具有较好的重现性。 Table 1 Reproducibility of the method No. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 RSD( %) Intensity of fluorescence 649 647 639 644 645 653 661 660 663 657 639 1. 34 2. 5 抗氧化剂清除羟自由基作用的测定 于体系中加入抗坏血酸,按实验方法测定空白体系的 F0、 · OH体系的 F、 加清除剂体系的 Fs。荧光 强度变化如图1所示 ,结果表明 ,随抗坏血酸用量增加 ,清除率加大。说明本体系中抗坏血酸与· OH的清 除作用具有明显的量效关系。 2. 6 水果的抗氧化作用 测定了9种新鲜水果的水提取物对· OH的清除率 ,结果见表 2。从表中可以看出 ,桃、 橙子、 香瓜、 香 蕉、 西红柿等具有较强的清除· OH的功能。 Table 2 Comparison of scavenging effect on · OH of extracts of some fruits Fruit Scavenging rate ( %) Fruit Scavenging rate ( %) Orange skin 47. 9 (10) Watermelon skin 78. 3 (5) Peach 87. 2 (8) Watermelon 60. 9 (5) Orange 86. 0 (8) Pear 59. 6 (5) Muskmelon 81. 5 (8) Strawberry 43. 8 (5) Banana 80. 0 (8) Apple 34. 1 (5) Tomato 79. 4 (8) Note : In parentheses , the number is dilution times 参考文献: [1 ] 吴 南 ,任凤莲 ,吴心传. 应用化工[J ] ,2000 ,29 (4) :30. [2 ] 吴 南 ,任凤莲 ,吴心传. 分析测试学报[J ] ,2001 ,20 (2) :52. [3 ] 韩鹤友 ,何治柯 ,曾云鹗. 分析化学[J ] ,1999 ,27 (8) :890. [4 ] 徐向荣 ,王文华 ,李华斌. 分析化学[J ] ,1998 ,26 (12) :1460. [5 ] 谷学新 ,邰 超 ,邹 洪. 分析科学学报[J ] ,2002 ,18 (6) :460. Determination of Antioxidant Activity in Several Kinds of Fruit by Fluorimetry with Fluorescein Sodium2Mn2 + 2H2O2 System ZANG Yun2bo , ZHANGAi2mei 3 ( Institute of Chemistry and Chemical Engineering , Liaocheng University , Liaocheng , Shandong 252059) Abstract : Fluorescein sodium can produce its characteristic fluorescence with its excitation and emission wavelength at 491nm and 512nm , respectively. Fluorescein sodium is oxidized by hydroxyl radical rapidly and fluorescence is quenching. Extractives of fruits may eliminate hydroxyl radical in solution. Then , quenching level of fluorescence of solution will be lowered. Based on this principle , a new method is developed to determined eliminating ratio of fruit for hydroxyl radical . The antioxidative activity of 9 kinds of fruits is determined. The results show that the antioxidative activity of orange skin is the strongest , followed by peach , orange , muskmelon , banana and tomato. Key words : Fluorescence spectrophotometry ; Fruit ; Hydroxyl radical ; Fluorescein sodium 38 第1期 分 析 科 学 学 报 第21卷Sample TextSample Text |
2楼2008-12-11 13:18:34
3楼2008-12-16 15:02:53
怎么发放金币啊
zhjf(金币+0,VIP+0):请虫友到分析版帖子回帖你可以发放金币，但是要注明在精化版得到应助；或者你pm分析版版主关帖返还金币后，告诉我，我这里帮你发金币！建议后者！
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感谢虫友jayzhou5351 ，虽然不是具体结构产物，但还是要谢谢他，我在化学－分析化学版面设置了金币，请这个虫友去那个版面领取20个金币吧，请版主帮助下，我不指导怎么才能给他金币，我在那个版面扣除了40个金币已经。那个帖子的地址为 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1095192 |
4楼2008-12-23 09:11:53
5楼2008-12-25 08:12:49