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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » CRISPR_cas9
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徐云帆

新虫 (初入文坛)

[求助] CRISPR_cas9 已有2人参与

CRISPR_cas9具体在靶序列（间隔序列20nt）那个位子照成双链断裂？距离PM位点NGG最近的一个核苷酸到5端依次编号1---20   具体是哪个核苷酸之间断裂？各位大神帮忙。

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2017-01-01 16:51:19
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草溪河

铁虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-02-13 23:03:51
根据我们目前在植物中利用该技术获得几十个突变体材料来看，主要是靠近PAM（即NGG）端的2-4个碱基，也不排除更宽的位点。
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2楼2017-01-01 23:47:39
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雪糕团

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 草溪河 at 2017-01-01 23:47:39
根据我们目前在植物中利用该技术获得几十个突变体材料来看，主要是靠近PAM（即NGG）端的2-4个碱基，也不排除更宽的位点。

你好，我也是做植物的，请问，转大肠时，用Atu3d时，涂了X-gal的板子没变蓝，是为什么。谢谢
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3楼2017-02-08 23:23:23
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6_pengfei

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

PAM前3、4个碱基之间，按你的编号3和4之间。
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努力精修
4楼2017-02-10 11:52:35
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徐云帆

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 6_pengfei at 2017-02-10 11:52:35
PAM前3、4个碱基之间，按你的编号3和4之间。

谢谢！

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5楼2017-02-13 20:48:38
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

现在已经研究非常清楚了。一般3-4之间，也可能4-5之间。每个guide rna都不一样。

发自小木虫IOS客户端
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
6楼2017-02-15 10:21:24
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