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A蛋白连载mbp标签的载体上,B蛋白连载GST的载体上。B-GST蛋白挂在柱子上,A-mbp蛋白纯化,两者做pull-down。第一次跑WB的时候都很正常,AB互作,且mbp空载和B-GST没有非特异性结合。同样一份样品再跑一遍WB,结果就变成AB的互作变得很弱,且mbp和B-GST有非特异性结合。两次WB的上样量,抗体,孵育时间都是一样的。 发自小木虫IOS客户端 |
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