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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Nigori

铜虫 (小有名气)

[交流] 蛋白质含量测定实验 已有1人参与

Bradford色法比Lowry法要简单迅速,是测定蛋白质浓度的选用方法。有些物质会干扰这种检测反应,它们是甘油、去污剂、2-巯基乙醇、乙酸、硫酸铵、和一些碱性缓冲系统。用脱氧胆酸/三氯乙酸沉淀蛋白可排除大部分这些干扰物质的影响。

实验材料        蛋白质

试剂、试剂盒        牛血清、NaCl、考马斯亮蓝

仪器、耗材        分光光度计、离心机

实验步骤

1.  分别在两组微量离心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白,以 0.15 mmol/l NaCl补足至100 μl,同时以两管100 μl 的0.15 mmol/l NaCl作空白对照。
 
2.  每管各加入1 ml考马斯亮蓝染料溶液,振荡混匀,室温放置2 min。

3.  用1 cm 光径的微量比色杯测A595,取A595吸光值对标准蛋白浓度作图,画出标准曲线,并测量待脚样品的A595,从BSA标准曲线中确定待测样品的浓度。
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820634292

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
搂主,我想请问一下“用脱氧胆酸/三氯乙酸沉淀蛋白可排除大部分这些干扰物质的影响。”指的是对沉淀蛋白质的影响很小还是上清液?或者是否可以理解成三氯乙酸不会对该法所测得的蛋白质含量产生影响呢?
2楼2017-11-30 10:15:35
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