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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 请问过硅胶柱粗分
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liu33feng

[交流] 请问过硅胶柱粗分

各位同仁
请问
我用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，发现乙酸乙酯层为活性物质部分
得乙酸乙酯浓缩物干样大概50g
现在想过硅胶柱粗分下。
不知道用什么样型号的柱子好了
我有6cm*60cm的可以吗  用100目的硅胶
是不是太粗了

还有是 洗脱机 用氯仿：甲醇 10：1-1：1 梯度
可以吗
加样 用拌样好了，还是溶液加样好了。
请各位强人指点一二
不甚感激。

[ Last edited by liu33feng on 2008-12-10 at 18:28 ]
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1楼 2008-12-10 18:26:09
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lqqm

银虫 (小有名气)
不是吧，这个帖子好像刚才在药分那边也看到了
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2楼2008-12-10 21:25:01
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独步青云

新虫 (职业作家)

术中小生
★ ★
lwf991229(金币+0,VIP+0):感谢参与讨论~
lwf991229(金币+2,VIP+0):3Q~
一般粗分的话，硅胶用量为样品（1：1拌样后的样品的质量）的6—10倍，你的需要大约600克左右硅胶的样子，当然少些也问题不大，粗分嘛，关键看你的洗脱剂的极性选择合适程度了。
一般装柱用干法装柱，手捏加压球或者气压泵加压用起始洗脱剂冲透（硅胶呈半透明样）。上样也为干法上样，少量溶剂溶解加硅胶拌样后烘干（如果你的目标成分耐热的话）上样。
这个起始洗脱剂的选择不是按照程度来，要根据你的样品的性质来选择。TLC摸条件，使你最上面的点的RF值在0.1-0.2之间，用这个起始比例梯度洗脱，注意刚开始时梯度的增加不要过快，这样会影响分离效果。
还有，有留点上样的样品作零号对照用。随时监查洗脱剂的洗脱能力。

希望对你有用。哈
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3楼2008-12-10 22:23:05
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liu33feng

太谢谢了,
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4楼2008-12-11 09:35:42
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gsjgsjgsj007

铜虫 (小有名气)
独步青云说的很有道理！但我上硅胶和上样都是湿法，效果也可以。
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5楼2008-12-11 21:32:58
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chenyuhong

木虫 (小有名气)
★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢参与讨论~
　５０g左右的物质一般是不采用过柱分离的　　你得到的浓缩物是油状的还是固体的？　若是固体的可以采用重结晶的方法比较方便。若一定要过柱分离，你的混合物中含有多少中物质成分？也就是说用你的展开剂做薄层分析时，有几个点？几个点之间的Ｒf值差值大不大　？　若你要的物质所显示的点和其它的点之间的差值比较大，那么硅胶就可以少点，柱子也可以小些。
　
　至于洗脱剂就要看能否分离你的物质呢　你要把不同时期可能要分离的点先做出分析。
加样的话湿法和干法的差别不大，完全取决个人的喜好和条件的方便。我们一般是用良溶剂把样品溶呢，采用湿法。具体的请询问你们有机专业的
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6楼2008-12-14 11:52:39
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