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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr空白对照老是出现目的条带，做的我都生无可恋了，求指点
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)

[求助] pcr空白对照老是出现目的条带，做的我都生无可恋了，求指点 已有2人参与

最近在做pcr，空白对照老是出现条带，刚开始是引物二聚体和目的条带一起出现，现在只有目的条带，我都是在超净台做的

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哈哈
1楼 2016-12-28 07:45:54
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

生物狗-哈

新虫 (初入文坛)
这个问题应该是气溶胶污染，可以试试诺唯赞的试剂，他们家技术支持很给力
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9楼2016-12-28 13:55:45
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普通回帖

peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是菌落pcr还是普通pcr，我觉得你可以尝试所有试剂都换一下尝试一下，包括所用的水，排除试剂的影响，看看是不是试剂受到污染。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

guishuai_tj
2楼2016-12-28 08:06:40
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2014092101
。

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3楼2016-12-28 08:13:02
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allegory

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

guishuai_tj
4楼2016-12-28 08:47:30
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)
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引用回帖:
2楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-28 08:06:40
是菌落pcr还是普通pcr，我觉得你可以尝试所有试剂都换一下尝试一下，包括所用的水，排除试剂的影响，看看是不是试剂受到污染。

普通pcr，做了好久都这样，做的都没信心了

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5楼2016-12-28 10:47:43
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by allegory at 2016-12-28 08:47:30
肯定哪个试剂存在污染，否则不会这样。如果用新的去离子水都出来，那证明是PCR体系的其它试剂，建议全部换崭新的重新做。

恩，也打算买新试剂试试

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6楼2016-12-28 10:48:39
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夏至1990

金虫 (小有名气)

小小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
能做出来PCR产物，需要酶， 模板，  引物。

考虑你的污染可能性，做阴性对照，   一组去掉酶，2组去掉模板，  3组去掉引物，4组去掉buffer，5组直接换一换水，
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

guishuai_tj
Sodoyouwanttotakealeapoffaith…orbecomeanoldman,filledwithregret…waitingtodiealone?
7楼2016-12-28 11:25:31
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guishuai_tj

铁虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 夏至1990 at 2016-12-28 11:25:31
能做出来PCR产物，需要酶， 模板，  引物。

考虑你的污染可能性，做阴性对照，   一组去掉酶，2组去掉模板，  3组去掉引物，4组去掉buffer，5组直接换一换水，

谢谢，如果按照你的思路，1.3.4组应该没有条带，因为缺少酶，引物，或者buffer的话，即便污染了也估计p不出来，有点没理解过来

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8楼2016-12-28 11:42:40
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生物狗-哈

新虫 (初入文坛)
这个情况可能是气溶胶污染了，可以试试诺唯赞的PCR试剂，他们家技术支持很给力
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10楼2016-12-28 13:58:24
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