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hikers86

木虫 (正式写手)

[求助] 疑惑!CD3 CD4 CD8流式图分析

我测小鼠外周血的CD4 /CD8值,FITC-CD3、PE-CD4、APC-CD8三种抗体,一种方法是再FSC-SSC散点图中圈出淋巴细胞,再分析CD3+CD4+、CD3+CD8+。另外一种方法是在FSC-FITC-CD3散点图中圈出FITC阳性,在分析PE-APC散点图,计算CD4/CD8。

结果两种方法差的很多,差别的原因是FSC-SSC最左下角的细胞团中也有FITC阳性,是我电压没调好还是淋巴细胞设门的时候错了呀?

第一种方法:淋巴细胞设门

疑惑!CD3 CD4 CD8流式图分析
1482808422(1).png

第二种方法:CD3设门

疑惑!CD3 CD4 CD8流式图分析-1
1482808458(1).png
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

设门都是手动的,当然有误差
2楼2016-12-28 10:04:31
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徐州往事

铁杆木虫 (正式写手)

首先溶血没做好,还有很多红细胞,导致第一张图FSC/SSC上淋巴细胞群根本不明显,同时会干扰你的结果。建议溶血重做。

发自小木虫Android客户端
3楼2017-01-05 18:10:26
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徐州往事

铁杆木虫 (正式写手)

4楼2017-01-05 18:11:03
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