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禹馀道人

新虫 (小有名气)


已领完
血液DNA一直提不出来
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用下面的方法提人血的DNA一直不成功,求大神帮忙分析原因

血液DNA一直提不出来


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激荡风雷

至尊木虫 (文坛精英)


★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-27 07:26:32
你是不是没有静置去除红细胞?红细胞没有细胞核,破裂后释放出来的内容物可能干扰。

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13楼2016-12-25 12:12:41
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蜜蜡鱼

银虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
血液和其他组织还是有区别的吧。细胞少,且红细胞没有细胞核。

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14楼2016-12-25 12:13:07
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激荡风雷

至尊木虫 (文坛精英)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by 禹馀道人 at 2016-12-25 12:35:17
怎么去除??
...

加入抗凝剂,静置后去掉血浆,取上层血浆底层红细胞交界处颜色泛白的细胞。

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17楼2016-12-25 13:27:26
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
20楼: Originally posted by 禹馀道人 at 2016-12-26 22:49:47
样品多,老师想找个便宜的方法
...

试剂盒也要不了几个钱,这点钱都省的老板也不会有多大出息,或者是你这个实验没多少价值。
21楼2016-12-27 08:48:24
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
提取血液和其他细胞应该还是有区别的,而且红细胞是没有细胞核的,提取上可以使用BIODAI的一种盒子,效果上还是可以的。
22楼2019-01-28 16:41:08
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junxia328

木虫 (著名写手)


12楼2016-12-25 12:10:39
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禹馀道人

新虫 (小有名气)


引用回帖:
13楼: Originally posted by 激荡风雷 at 2016-12-25 12:12:41
你是不是没有静置去除红细胞?红细胞没有细胞核,破裂后释放出来的内容物可能干扰。

怎么去除??

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15楼2016-12-25 12:35:17
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禹馀道人

新虫 (小有名气)


引用回帖:
14楼: Originally posted by 蜜蜡鱼 at 2016-12-25 12:13:07
血液和其他组织还是有区别的吧。细胞少,且红细胞没有细胞核。

里面有白细胞吧

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16楼2016-12-25 12:35:39
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rhapsody007

金虫 (小有名气)



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人血DNA感觉还是挺好提的啊,不过我一直用的磁珠在做,其他方法没用过。。
18楼2016-12-26 09:24:22
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)



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你这个方法是提取培养细胞的,直接用试剂盒提取得了,血液样品需要特殊处理。
19楼2016-12-26 16:52:46
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禹馀道人

新虫 (小有名气)


引用回帖:
19楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2016-12-26 16:52:46
你这个方法是提取培养细胞的,直接用试剂盒提取得了,血液样品需要特殊处理。

样品多,老师想找个便宜的方法

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20楼2016-12-26 22:49:47
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dsiana

新虫 (初入文坛)



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先用水洗,离心去上清,加入200ul的chelex100悬浊液,56度水浴混匀均可,30分钟后100度变性8分钟,然后高速离心,取上清扩增。

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23楼2019-01-31 21:19:49
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)



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血液DNA提取一般有离心柱型,溶液型和磁珠法三种,原理及步骤基本相同。虽然各公司推出了多种类似产品,让人不知如何去选择,但从原理和操作步骤看,基本就是离心柱型,溶液型或者磁珠法,我们所用的离心柱BIOG RNA Tissue Kit方法的提取比磁珠法纯度高一些,且单次处理样本的费用也比磁珠法要低
24楼2019-03-22 08:50:13
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2016-12-25 12:04   回复  
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2016-12-25 12:04   回复  
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ciyang8734楼
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zxt20185楼
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HTB声6楼
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孤-岛7楼
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koobeexia8楼
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han伊森9楼
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MSPX10楼
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summer906911楼
2016-12-25 12:05   回复  
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