| 查看: 3154 | 回复: 4 | ||
[求助]
q-PCR筛选内参基因，加样以及分析问题
|
我现在在做筛选内参基因，现在有6个，老师让我先做一个处理，看看内参特异性之类的，我现在做了两次，但是对加样还是比较疑惑，比如我昨天做了一个，6个内参（作为引物加入），3和重复，用了10倍稀释模板，出来数据我看了大都用相对定量的△t方法，可是我这个貌似没有比较啊。。。只有六个内参，我之前求助过的检测内参特异性我还是不怎么懂，不知道怎么弄。出来的图也不怎么懂，哎好像很难回答。我这里有数据，大家帮我看看我怎么弄，是否需要再加一个无处理模板在做一边荧光，然后再做相对定量分析呢？ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有140人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
504775490
金虫 (知名作家)
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 5689.2
- 散金: 1155
- 红花: 22
- 帖子: 9590
- 在线: 290小时
- 虫号: 1309424
- 注册: 2011-05-29
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-24 21:17:07
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-24 21:17:07
|
如果是同样的模板的话，根据你的结果建议选择18s,EF和ACT这3个基因作为你的内参基因，一般情况下内参选用Actin和GAPDH都是可以的，有的个别样本或组织选用其他基因作为内参，你可以查一下相关文献看看用什么！祝好～ 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-12-24 17:20:26
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-25 10:51:10
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-25 10:51:10
|
你得有两组，一组处理组，一组对照组，用这两组最后的cDNA做模板，再加入你的6种内参引物，这样最后qPCR的结果都有2??6 12个了，再加上如果做3次重复，结果应该是36个。你少设了个对照组。 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2016-12-25 10:22:22
4楼2020-08-05 10:46:00
5楼2020-08-05 10:48:11
