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2012csc

至尊木虫 (知名作家)

[求助] WesternBlot 灰度分析 已有1人参与

请教一下WB条带灰度分析时,内参应该如何处理,是实验组条带比上内参条带的灰度值然后作图分析;还是内参不用处理,内参灰度值基本一致就可以,比较实验组各条带灰度值即可?
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分子生物?

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 2012csc at 2016-12-22 17:37:03
请教一下WB条带灰度分析时,内参应该如何处理,是实验组条带比上内参条带的灰度值然后作图分析;还是内参不用处理,内参灰度值基本一致就可以,比较实验组各条带灰度值即可?

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2楼2016-12-22 18:54:57
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
2012csc: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-12-23 15:00:09
灰度值本身没有可比性,比值才有价值。
首先,目的蛋白的带之间进行比较,取其中一个泳道的目的带的数值为基数,其它泳道的数值除以该基数。
其次,内参也做同样的处理。
最后,目的带的相对灰度(比值)除以内参的相对灰度(比值),该结果说明相同细胞数的每种样品的目的蛋白数量多少。
3楼2016-12-23 10:42:09
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

WB本来就是半定量实验,灰度扫描也有较大误差,如果内参基本一致的情况下没必要进行灰度扫描。就是个定性比较。
4楼2016-12-23 10:44:32
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