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chen4650007

新虫 (初入文坛)

[交流] Inspire PFP 五氟苯基

Inspire PFP ( 五氟代苯基) 是Inspire 液相色谱柱家族新成员,针对分离极性化合物过程中的保留时间和分离度问题而特别设计。Inspire PFP 凭借其优异的选择性,可为极性化合物、复杂天然产物、位置异构体和其它相关化合物在C18 和C8 色谱柱上的分离提供一个替代和补充。Inspire PFP 具有U 型色谱分离特性,适用于正相、反相和亲水作用色谱三种分离模式,并具有多种作用机理,因而能够同时分离检测不同极性化合物的混合物,为目前难以解决的复杂极性和亲水性样品的分离分析提供了强有力的工具,可轻松解决其它色谱柱面临的分离难题,为用户实现强极性分析物的优异选择性提供一种更加便捷的途径。同时也为色谱工作者使用简单流动相,避免使用极端pH 条件和准备复杂流动相提供了可能性。
Inspire PFP 色谱柱特点
• 五氟代苯基硅烷键合在高纯硅胶基质上
• 具有U 型色谱分离特性,适用于正相、反相和亲水作用色谱三种分离模式
• 对极性化合物具有独特的保留能力
• 良好的峰形、超高的柱效、分离度和使用寿命
• 适用于芳环类化合物或长共轭体系化合物的分离
• 优异的批次重现性

增强位置异构体分离能力
官能团位置的微小差异可以极大的影响分子性能,在许多情况下,传统的C18色谱柱根本无法扑捉到这种细微的差异。然而,InspireTM PFP的多功能选择性却可以区分由于分析物内部微小位置变化而导致的分析物的空间位阻变化还是分析物的偶极矩偏移。
色谱柱   如图所示
规格      150 × 4.6 mm, 5 μm
流动相   0.1% 甲酸乙腈溶液:0.1% 甲酸水溶液 = 40:60
流速       1.5 mL/min
柱温       室温
检测器    UV 254 nm
样品
1. 3,4-二甲氧基苯酚  
2. 2,6-二甲氧基苯酚
3. 3,5-二甲氧基苯酚
4. 2,6-二氟苯酚
5. 2,4-二氟苯酚
6. 2,3-二氟苯酚
7. 3,4-二氟苯酚
8.3,5-二甲基苯酚
9.2,6-二甲基苯酚
10.4-氯-3-甲基苯酚
11.4-氯-2-甲基苯酚
12.3,4-二氯苯酚
13.3,5-二氯苯酚
Inspire PFP 五氟苯基
11.jpg
苯氧酸类化合物
分子上卤素的加入可以从根本上增强化合物的极性,而极性的变化通常伴随着反相色谱柱在保留时间和分离能力上困难的增加。此时使用InspireTM PFP 是解决保留问题的最有效的方法。InspireTM PFP利用偶极-偶极和氢键作用更好地保留,区分和分离极性卤化化合物。
色谱柱   如图所示
规格      150 × 4.6 mm, 5 μm
流动相   乙腈:0.1% 甲酸水溶液 = 50:50
流速      1.0 mL/min
柱温      室温
检测器   UV 220 nm
样品
1. 苯氧乙酸
2. 邻氯苯氧乙酸
3. 对氯苯氧乙酸
4. 2,4-二氯苯氧乙酸
5. 2,4,5-三氯苯氧乙酸
6. 2,4,5-三氯苯氧丙酸
Inspire PFP 五氟苯基-1
22.jpg
类固醇
通过整合偶极-偶极、π-π和氢键机理,InspireTM PFP实现标准反相条件下极性化合物的最佳分离。
色谱柱   如图所示
规格      150 × 4.6 mm, 5 μm
流动相   甲醇:水 = 60:40
流速      1.5 mL/min
柱温      室温
检测器   UV 254 nm
样品
1.泼尼松龙
3.地塞米松
5.氢化可的松21-乙酸酯
7.可的松-21-乙酸酯
2.泼尼松
4.皮质酮
6.11-α羟孕酮
8.11-酮孕甾酮
Inspire PFP 五氟苯基-2
33.jpg
甲基苯乙酮异构体
目标分析物上的基团位置变化可以影响化合物的偶极矩,这种变化可以很容易被高电负性的氟原子和其它保留机理察觉,因此InpireTM PFP可以有效地用于分离甲基苯乙酮的位置异构体。
色谱柱   如图所示
规格      150 × 4.6 mm, 5 μm
流动相   甲醇:水 = 50:50
流速      1.0 mL/min
柱温      室温
检测器   UV 254 nm
样品
1. 邻 -甲基苯乙酮
2. 对 -甲基苯乙酮
3. 间 -甲基苯乙酮
Inspire PFP 五氟苯基-3
44.jpg
核苷酸和核苷
色谱柱   如图所示
规格      150 × 4.6 mm, 5 μm
流动相   0.1% 甲酸水溶液
流速      1.0 mL/min
柱温      室温
检测器   UV 220 nm
样品
1. 胞嘧啶
2. 5'-CMP
3. 5'-UMP
4. 5'-GMP
5. 尿苷
6. 胸腺嘧啶           
Inspire PFP 五氟苯基-4
55.jpg
抗胃酸药
色谱柱   如图所示
规格      150 × 4.6 mm, 5 μm
流动相   乙腈:20 mM 磷酸氢二钾(pH 7.0) = 20:80
流速      1.0 mL/min
柱温      室温
检测器   UV 220 nm
样品
1.法莫替丁
2.西咪替丁
3.尼扎替丁
4.雷尼替丁           
Inspire PFP 五氟苯基-5
66.jpg
氧化应激标记物
色谱柱     如图所示
规格        150 × 4.6 mm, 5 μm
流动相     乙腈:25 mM 乙酸铵(pH 3.0) = 3:97
流速         1.0 mL/min
柱温         室温
检测器      UV 220 nm
样品
1. 2'-脱氧鸟苷
2. 8-羟基-2'-脱氧鸟苷           
Inspire PFP 五氟苯基-6
77.jpg
儿茶酚胺
色谱柱    如图所示
规格       150 × 4.6 mm, 5 μm
流动相    50 mM 乙酸铵 (pH 3.0)
流速       1.0 mL/min
柱温       室温
检测器    UV 270 nm
样品
1. 去甲肾上腺素
2. 肾上腺素
3. 多巴胺         

Inspire PFP 五氟苯基-7
88.jpg
Inpire PFP柱在HILIC模式下对极性化合物的保留变化
       HILIC色谱柱的保留机理目前还不清楚。有人认为是分配机理,也有人提出保留是基于溶质在固定相上的吸附,而更多的实验现象则表明HILIC的保留机理包含氢键作用、偶极作用和静电作用等多种效应,因而目前很难总结出一个统一的规律。
       最近我们制备了InspireTM PFP键合相,它是一种兼具正相、反相和亲水作用色谱等多种分离模式的高效液相色谱填料。研究发现,以乙腈:20 mM醋酸铵(pH 5.6)为流动相,应用去甲替林作为测试样品。当流动相中有机相浓度增加时,溶质的保留时间下降,表现出反相色谱的保留机理;随着流动相中有机相浓度继续增加,溶质的保留时间快速增加,表现出正相色谱的保留机理。实验结果表明:InspireTM PFP色谱柱同时具有正相、反相和亲水作用色谱等分离模式,可有效地同时分离检测不同极性化合物的混合物,因而有望对目前不能解释的亲水色谱作用机理提供新思路。
色谱柱     Dikma InspireTM PFP
规格        150 × 4.6 mm, 5 μm
流动相     A: 乙腈     B: 20 mM 乙酸铵 (pH 5.6)
流速        1.0 mL/min
柱温        室温
检测器     UV 215 nm
样品
去甲替林           
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Inspire PFP 五氟苯基-8
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