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铁虫 (初入文坛)

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[求助] 碧云天的ABTS法抗氧化能力检测试剂盒

请问用碧云天的ABTS法抗氧化能力检测试剂盒测得标准曲线不是直线，而 ABTS法测定总抗氧化能力的原理是，ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的ABTS+，在抗氧化物存在时ABTS+的产生会被抑制，在734nm或405nm测定ABTS+的吸光度即可测定并计算出样品的总抗氧化能力。但是我测的样品显色是橙色而非绿色，原因是什么？但是吸光度是在标准曲线的有效范围内的，而且测出来随着样品浓度增大，计算得出的抗氧化能力越弱。请分析一下原因.谢谢了

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1楼 2016-12-21 15:19:35

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不想漂流

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

我以前经常做抗氧化，也建立过ABTS的方法，不过不是用的试剂盒，我想应该都差不多从原理上。
那么试着回答一下

1、你的样品自身是否有颜色？建议在734nm、405做一个空白试验，分别扫描一下你样品在实验条件下的背景吸光度，如有条件甚至可以扫一下全波长。
2、如果样品没有吸光度或者已经扣除了吸光度后，清除率仍然不随着样品浓度升高而增大，建议尝试更换样品浓度区间。在初筛时，我们更经常地将浓度区间设置的大一点，因为第一次做实验，样品清除率是好是坏我们也没有数。

在我看来，你更可能是样品浓度过高了。因为你样品已经没有绿色了，而橙色多半又由样品引起，所以我想到扫描样品吸光度、调整样品浓度。