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fzhrobin

木虫 (正式写手)

[交流] 关于多肽上质谱的问题

我们采用酚法和TCA丙酮法以及SDS方法提取植物蛋白,提取的蛋白酶解成肽段后,在脱盐冻干后再复溶后,采用热电的纳升液相-高分辨质谱(nanoLc-orbitrap)进行样品采集,结果经常发现喷雾不稳定,液相压力有点过高,怀疑上机的多肽样品不够纯净,就想上机前的肽段是不是还是需要过滤一下,以防肽段样品中还有杂质以至于堵塞液相?如果需要过滤,请问大家都用的什么样的滤膜或者说对滤膜有什么样的要求?
      谢谢大家!
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scauwangyi

木虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以求问你是怎么脱盐的吗?我有个反应的混合液也想做高分辨质谱,不知道应该怎么脱掉磷酸盐。。。
2楼2019-10-04 20:18:02
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S8032

银虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
超速离心就好,过膜如果丢失惨重,你可惜不?
3楼2019-10-05 10:09:57
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S8032

银虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by scauwangyi at 2019-10-04 20:18:02
可以求问你是怎么脱盐的吗?我有个反应的混合液也想做高分辨质谱,不知道应该怎么脱掉磷酸盐。。。

过个小脱盐柱子,两分钟完毕。//如果蛋白,也可以dialysis, much more time and could lost somewhere
4楼2019-10-05 10:13:59
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