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请问有哪位做过肉桂醇脱氢酶(C A D ) 的活性 ，请较测定方法，谢谢！
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请问有哪位做过肉桂醇脱氢酶(C A D ) 的活性 ，急求测定方法，谢谢！ 文献上的方法：随机取 4个果实并称取 20. 0 g枇杷肉于电动机中 ,加入事先预冷的0.1 mmo l /L, pH 6. 5磷酸缓冲液 (含巯基乙醇 15. 0m mol /L和 2. 0 % PEG) 60. 0 m L及 2. 0 g的 PV PP,匀浆后于 4℃ , 16000 r /min离心 30 min,取上清液作酶活性测定。 反应液含有 0. 2 m L酶提取液 , 1. 25 m L 6. 4m mol /L的 N ADP, 3. 2 m mol /L 的反式肉桂酸 1. 25m L, pH 6. 5磷酸缓冲液 1. 3 m L,总体积 4. 0 m L,以煮过的酶液作空白对照 (其它所加底物、 N ADP和缓冲液与试验组相同 ); 37℃保温 30 min, 1. 0 N 的 HCl终止反应 ,如有沉淀离心除去。酶活性以反应夜在 340 nm处光吸收值每分钟变化 0. 001吸光度值为一个酶活性单位 ,结果以 U· g- 1表示。 测定 3次重复。 但是测出来不对，求教谁做过，给一个方法，谢谢！ |
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