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细胞增殖生长方面实验
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实验方法原理 测定细胞绝对增长数值常用最简便的方法。 一般过程为 1. 接种21 孔/24 孔板细胞(如用培养瓶时则21 瓶)。 2. 分7 组,每组3 孔(或瓶),培养一周(7 天),期间逐日检测一组,计数。 3. 把7 天中的细胞数值绘成图,即为细胞生长曲线。 实验材料 细胞 试剂、试剂盒:胰蛋白酶 仪器、耗材:吸管 实验步骤 1. 悬液制备 取待测生长状态良好细胞,增长至接近汇合时,向培养瓶内加1 ml升0.25 %胰蛋白酶液,37 ℃温箱中消化,至细胞接近脱离瓶壁前吸出消化液、加新的培养液、轻吹打制备成细悬液、计数; 2. 接种 向每孔中接种等量细胞,置温箱中培养;把培养瓶中营养液倒入试管中并记录下毫升量; 3. 计数检测 从次日起,即开始检测第一组每个孔(或瓶)中的细胞总数,用计算盘或用细胞自动计数器计数,取3 个孔的均值,如此至第7 组结束; 4. 绘图 用座标图纸绘成生长曲线。 |
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