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谁做过免疫法建立SD大鼠RAU模型，有些细节方面想请教
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最近在建立SD大鼠RAU模型，应用免疫法造模过程中遇到了一些问题。 我造模过程：麻药处死大鼠剥取口腔黏膜，用无菌生理盐水冲洗干净，装入EP管放入-80 冰箱保存备用：配制抗原乳化剂时，取出一定数量按一只大鼠口腔黏膜加1ml PBS用玻璃匀浆器匀浆（匀浆之前先将组织用小剪子剪碎了），再按匀浆与弗氏佐剂1:1在涡旋震荡器上混悬20分钟。将SD大鼠实验组背部毛剔除后，常规消毒，在SD大鼠脊柱两侧皮内注射上述组织乳化剂，每只注射两点，每点０.１ｍＬ，１次／１周×８次。按照文献，则应该在抗原注射第３周大鼠口腔两侧颊黏膜内出现不同程度的充血和红肿，注射抗原第４周后大鼠开始出现口腔溃疡。但是我在第三周、第四周并没有发现有溃疡迹象，注射六次也未发现有溃疡。我共做了两次预实验，第一次是匀浆后离心取上清液制备抗原，第二次未离心制备，但两次均为成功。对此，我有一些疑惑希望大神能为我解惑。 1、 用免疫法制备大鼠RAU模型的原理是什么？是组织还是组织蛋白使大鼠产生口腔溃疡？ 2、 我认为模型的制备成功关键在于抗原乳化剂的制备，然而我每次打完组织乳化剂后大鼠背部鼓起一个包，说明制备的抗原乳化剂大鼠吸收不了。不管我混匀多久静置还是会分层，且大鼠口腔黏膜组织匀浆还不够细小，易堵塞注射器针头。不知能否透露抗原制备过程中的一些细节问题呢？如一只大鼠黏膜组织与PBS的比例是多少；如何将黏膜组织研磨细至注射器可吸入；匀浆与弗氏佐剂混合均匀的关键地方是怎么处理的？ 3、 造模过程有什么注意事项？ 4、 如果给药治疗的话，大神觉得什么时间开始给药比较合适？ 我是个新虫，金币不多，求大神解惑  @lifeliuyan |
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