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引物和DNA模板量对退火温度有影响吗
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本人用巢式PCR方法做细菌氨氧化基因,改变第一步PCR的引物量和DNA量,并设置了退火温度梯度,第二步的条件不变,结果跑胶显示,引物、DNA均不变的,引物加倍的,DNA加倍的三种条件的最终产物在退火温度梯度下亮度趋势不一致(前面18个孔,即为引物、DNA均不变的,引物加倍的,DNA加倍的三组条件,每组6个温度梯度,从左至右为45℃~55℃递增)。 发自小木虫Android客户端 |
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