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1楼2016-12-15 15:29:06

liuye1990

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十四_14: 金币+20, ★有帮助 2016-12-23 17:07:31

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十四_14

2楼2016-12-15 16:25:50

peitaokong

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

看着像是伯乐的电泳槽，我看着好像有气泡，我觉得你的胶可能漏了。配胶是个细活，看似简单，但是要细心。

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十四_14

3楼2016-12-15 16:38:06

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2楼: Originally posted by liuye1990 at 2016-12-15 16:25:50
电压可能有问题，另外，配胶用的PH6.8和8.8TRIS-HCL的PH值可能不准了，建议重新测量一遍，还有就是空道应该用上样缓冲液补齐啊

谢谢你！我跑的是tricine-SDS-PAGE 我觉得样品有问题的可能性比较大但是想不到会是哪里出了问题

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4楼2016-12-15 17:01:58

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3楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-15 16:38:06
看着像是伯乐的电泳槽，我看着好像有气泡，我觉得你的胶可能漏了。配胶是个细活，看似简单，但是要细心。

感谢回复！
请问胶漏了是指什么地方？是胶与玻璃板之间吗？

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5楼2016-12-15 17:02:52

十四_14

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我是先90V跑，然后150V。空道为何要用上样缓冲液补齐？以前都是这样跑的请问补齐的作用是什么？谢谢！

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6楼2016-12-15 17:10:17

peitaokong

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十四_14: 金币+30, ★★★很有帮助 2016-12-23 17:07:12

引用回帖:

5楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-12-15 17:02:52
感谢回复！
请问胶漏了是指什么地方？是胶与玻璃板之间吗？
...

倒胶的时候，玻璃板一定要洗干净，不能有小颗粒的东西残留在上面。两个玻璃板要放平，需要注意的是玻璃板和下面胶垫之间一定要放好，这样才不会漏胶。看着像是玻璃板与胶之间有缝隙。有可能是玻璃板不配套，也有可能是不干净的颗粒，还有可能就是倒完胶放了太久，胶太干，这是我现在能想到的出现这种情况的原因。希望能够帮助你。

7楼2016-12-15 17:28:31

十四_14

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7楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-15 17:28:31
倒胶的时候，玻璃板一定要洗干净，不能有小颗粒的东西残留在上面。两个玻璃板要放平，需要注意的是玻璃板和下面胶垫之间一定要放好，这样才不会漏胶。看着像是玻璃板与胶之间有缝隙。有可能是玻璃板不配套，也有可 ...

很感谢你的回复！制胶的时候确实有漏但是每次制胶都会漏就是我分离胶加进去后水封放在37度凝胶凝好了就发现液面矮下去一点…就是漏了一点但我制胶前也有验漏都没问题以前跑普通的蛋白电泳也没问题
这个小分子蛋白电泳跑了很多次了有时候能跑的好一点有时候条带就会变成这样很苦恼

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8楼2016-12-16 09:42:22