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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

[求助] 电泳条带怎么会变成这样？ 已有2人参与

条带跑着跑着就变成这样了！求问什么原因？

电泳条带怎么会变成这样？


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1楼 2016-12-15 15:29:06
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liuye1990

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
十四_14: 金币+20, ★有帮助 2016-12-23 17:07:31
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十四_14
2楼2016-12-15 16:25:50
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peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看着像是伯乐的电泳槽，我看着好像有气泡，我觉得你的胶可能漏了。配胶是个细活，看似简单，但是要细心。
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十四_14
3楼2016-12-15 16:38:06
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十四_14

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2楼: Originally posted by liuye1990 at 2016-12-15 16:25:50
电压可能有问题，另外，配胶用的PH6.8和8.8TRIS-HCL的PH值可能不准了，建议重新测量一遍，还有就是空道应该用上样缓冲液补齐啊

谢谢你！我跑的是tricine-SDS-PAGE  我觉得样品有问题的可能性比较大  但是想不到会是哪里出了问题

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4楼2016-12-15 17:01:58
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十四_14

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3楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-15 16:38:06
看着像是伯乐的电泳槽，我看着好像有气泡，我觉得你的胶可能漏了。配胶是个细活，看似简单，但是要细心。

感谢回复！
请问胶漏了是指什么地方？是胶与玻璃板之间吗？

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5楼2016-12-15 17:02:52
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十四_14

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2楼: Originally posted by liuye1990 at 2016-12-15 16:25:50
电压可能有问题，另外，配胶用的PH6.8和8.8TRIS-HCL的PH值可能不准了，建议重新测量一遍，还有就是空道应该用上样缓冲液补齐啊

我是先90V跑，然后150V。空道为何要用上样缓冲液补齐？以前都是这样跑的  请问补齐的作用是什么？谢谢！

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6楼2016-12-15 17:10:17
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peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
十四_14: 金币+30, ★★★很有帮助 2016-12-23 17:07:12
引用回帖:
5楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-12-15 17:02:52
感谢回复！
请问胶漏了是指什么地方？是胶与玻璃板之间吗？
...

倒胶的时候，玻璃板一定要洗干净，不能有小颗粒的东西残留在上面。两个玻璃板要放平，需要注意的是玻璃板和下面胶垫之间一定要放好，这样才不会漏胶。看着像是玻璃板与胶之间有缝隙。有可能是玻璃板不配套，也有可能是不干净的颗粒，还有可能就是倒完胶放了太久，胶太干，这是我现在能想到的出现这种情况的原因。希望能够帮助你。
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7楼2016-12-15 17:28:31
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)
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7楼: Originally posted by peitaokong at 2016-12-15 17:28:31
倒胶的时候，玻璃板一定要洗干净，不能有小颗粒的东西残留在上面。两个玻璃板要放平，需要注意的是玻璃板和下面胶垫之间一定要放好，这样才不会漏胶。看着像是玻璃板与胶之间有缝隙。有可能是玻璃板不配套，也有可 ...

很感谢你的回复！制胶的时候确实有漏  但是每次制胶都会漏  就是我分离胶加进去后  水封 放在37度凝胶  凝好了就发现液面矮下去一点…就是漏了一点  但我制胶前也有验漏  都没问题  以前跑普通的蛋白电泳也没问题  
这个小分子蛋白电泳跑了很多次了  有时候能跑的好一点  有时候条带就会变成这样  很苦恼

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8楼2016-12-16 09:42:22
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