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waiwai0105

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒构建 已有4人参与

本人生物界菜鸟一枚,现在会读质粒图谱,但一直很纳闷,质粒是如何构建成的呢?只知道是从别的公司买的现成的,拿来直接用了,请问是如何构建成的呢?
请各位大侠普及~~~
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卷哥

金虫 (小有名气)

同问  我连质粒图谱都不咋看得懂 求指导
2楼2016-12-14 21:00:56
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peitaokong

银虫 (小有名气)

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引用回帖:
2楼: Originally posted by 卷哥 at 2016-12-14 21:00:56
同问  我连质粒图谱都不咋看得懂 求指导

质粒构建分为几个步骤,我简要说一下。1 引物设计要加上酶切位点 2 扩增基因 3 胶回收 4 双酶切 5 胶回收 6 连接 转化 7 测序
3楼2016-12-14 21:10:19
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peitaokong

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个只是很简要的步骤,具体的问题要具体看。你可以自己先看看,网上类似的应该很多。哪一步不清楚你可以再问,因为这个载体构建的步骤很多,没有办法给你详述了。
4楼2016-12-14 21:15:00
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geyihui

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒图谱中需要有一个载体,将你的目的基因通过酶切位点插入到载体的启动子之后,这样才能表达你的目的基因。完整质粒图谱包括载体框架(决定你的质粒表达系统),目的基因(你所要表达的重组蛋白)
5楼2016-12-14 22:15:32
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
详细链接可以参考下分子克隆这本书。链接:http://pan.baidu.com/s/1sltnpIt 密码:6fg3
知识就像蒲公英的花儿一样,播种在世界的每一个角落。
6楼2016-12-14 22:58:46
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
原始质粒来自细菌,通过酶切连接插入各种需要的DNA序列
7楼2016-12-16 17:03:58
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