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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » SDS-PAGE漏液
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YF_Gong

铁虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE漏液 已有2人参与

做的SDS-PAGE
5%浓缩胶 10%分离胶 电压100V

在浓缩胶部分的时候就出现了如图所示的情况 不知道是什么原因？

我尝试了一些改进：
1.灌胶前充分摇匀
2.灌注浓缩胶前用浓缩胶BUFFER润洗
3.上样时保持蛋白含量一致

经过几次尝试后情况略有缓解，但仍然出现。

请各位不吝赐教，万分感谢！

SDS-PAGE漏液
IMG_0147.JPG


SDS-PAGE漏液-1
IMG_0162.JPG
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没有梦想，和咸鱼有什么区别？！
1楼 2016-12-14 18:25:26
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

橙1子2

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

加上层胶前用双蒸水洗三次，再用吸水纸吸干。当然也有可能是你溶液配制及配胶过程出现了问题，我们实验室每天都跑蛋白胶，从没出现过漏液现象
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7楼2016-12-18 12:59:00
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普通回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
压缩胶和玻璃之间有缝隙，在加压缩胶时尽量风干玻璃。
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2楼2016-12-16 16:03:40
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)
就是配浓缩胶之前  用滤纸把玻璃板之间的水吸干  另外注意吸水的时候不要碰到胶面

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3楼2016-12-16 16:14:42
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漓江魂

铜虫 (小有名气)
其实这种缝隙是很明显的！

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4楼2016-12-17 11:30:14
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helpwater

新虫 (小有名气)
你好假如出现漏液，可以考虑边缘涂上细细的少量的凡士林。

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5楼2016-12-17 15:24:58
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helpwater

新虫 (小有名气)
在玻璃板接触的边缘涂。

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6楼2016-12-17 15:25:29
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Zero丶sushi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by helpwater at 2016-12-17 15:24:58
你好假如出现漏液，可以考虑边缘涂上细细的少量的凡士林。

除去凡士林的时候有点小麻烦。。。

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8楼2016-12-22 17:15:04
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helpwater

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Zero丶sushi at 2016-12-22 17:15:04
除去凡士林的时候有点小麻烦。。。
...

不麻烦，我们用海绵直接洗掉就可以了。不影响下次使用。

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9楼2016-12-23 00:40:30
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Zero丶sushi

新虫 (小有名气)
那还好，我们是刮掉的。

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10楼2016-12-23 08:09:34
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