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15515810048

新虫 (初入文坛)

[求助] 再次求助大神 已有3人参与

HPLC流动相用磷酸三乙胺-甲醇-乙腈(58:25:17)，这样的流动相是不是会很伤柱子？冲柱子的时候梯度如何设计？

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1楼 2016-12-13 15:34:59
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
比例是不是贴错了，磷酸三乙胺的比例太高了吧，用高水多冲冲，最后梯度切换至保存溶剂。
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归零
2楼2016-12-13 16:07:18
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懒人懒床

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
15515810048: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-12-13 17:45:54
一般可以用低流速的纯水冲洗30min，再用80%的甲醇冲洗30min。具体还要在看你的柱子，一般C18的柱子这样冲洗是可以的。我之前是这样做的，柱效还是好的。
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3楼2016-12-13 16:09:42
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
15515810048: 金币+3 2016-12-13 17:45:30
这样的流动相是挺伤柱子的 用完要立即清洗 不要让盐在柱子中析出凝结了 那就不好洗下来了
洗柱子梯度一般是低流速用大量水相冲洗50个柱体积然后再缓慢的增加有机相的比例，最后到95%的乙腈或者甲醇时在冲50个柱体积即可，觉得不放心可以反复多冲几次
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4楼2016-12-13 17:00:17
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15515810048

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by klicking at 2016-12-13 16:07:18
比例是不是贴错了，磷酸三乙胺的比例太高了吧，用高水多冲冲，最后梯度切换至保存溶剂。

没有贴错，真的是这么高的比例，我担心把老板柱子用坏了，那……

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5楼2016-12-13 17:40:27
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15515810048

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by llw1986 at 2016-12-13 17:00:17
这样的流动相是挺伤柱子的 用完要立即清洗 不要让盐在柱子中析出凝结了 那就不好洗下来了
洗柱子梯度一般是低流速用大量水相冲洗50个柱体积然后再缓慢的增加有机相的比例，最后到95%的乙腈或者甲醇时在冲50个柱体积 ...

多谢大神

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6楼2016-12-13 17:41:23
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15515810048

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 懒人懒床 at 2016-12-13 16:09:42
一般可以用低流速的纯水冲洗30min，再用80%的甲醇冲洗30min。具体还要在看你的柱子，一般C18的柱子这样冲洗是可以的。我之前是这样做的，柱效还是好的。

好的，多谢赐教

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7楼2016-12-13 17:42:25
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guduzhe689

新虫 (初入文坛)
同学习啊，
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8楼2016-12-13 20:00:15
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