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z妲妲

新虫 (小有名气)

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专业: 细胞生物学研究中的新方法

[交流] 蛋白质实验中一些试剂的名称和作用已有3人参与

1楼
1  三羟甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl)aminomethane，一般简称为Tris）是一种有机化合物，其分子式为(HOCH2)3CNH2。Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。例如，在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到Tris。由于它含有氨基，因此可以与醛发生缩合反应。

两种溶液作用机制不同

Triton X-100是一种非离子表面活性剂，有破膜作用

tris-HCl具有缓冲pH值作用，是一种碱性裂解液

2  Triton X-100 (曲拉通 X-100)（磷酸缓冲液）化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚，是一种优异的表面活化剂，润湿及洗涤剂。在免疫组织化学(厚切片) 和免疫细胞化学中，Triton X-100 被用来做细胞破膜剂/细胞通透剂，即在细胞膜上打孔。这样抗体就能进入内与相关的抗原结合了。

Triton X100一般在阻断缓冲液中或稀释缓冲液中使用，基本不用做洗液。使用浓度0.2%。较厚的石蜡切片更应该应用Triton X100，这样可以获得更好的染色背景。

Tris-HCl提供一个一定pH值缓冲环境，它的作用根据其不同的PH有很多作用，可以被用作梯度洗脱液，封闭液，总而言之就是为了控制溶液的PH。

3  水饱和酚与Tris饱和酚的作用与区别

•以前一直用的试验盒抽提质粒，产量最够应付试验需要；现在因客户要求量比较大，而购买提粒大量提取试剂盒不划算，决定采用手工大提质粒——其中一步是饱和酚处理，差点就直接用了水饱和酚而犯错误了。

　　现把收集整理的水饱和酚与Tris饱和酚的作用与区别分享给大家，希望对大家有所帮助：

  1、水饱和酚（Phenol Water）又叫水平衡酚。水饱和酚的PH小于7，一般是PH为5.0左右，通常与异硫氢酸胍一起使用，用于细胞RNA的提取，在酸性环境中，DNA在酚相，RNA在水相。两者就分开了。

  2、 Tris饱和酚（Tris-phenol）一般PH大于7.8，用于DNA的提取：

　其中，酚是强的蛋白变性剂，可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。

　而Tris的主要作用是防治止酚类氧化，若酚类氧化，则会形成醌（两个苯环），醌含有强自由基，会破坏核酸结构。

同时，由于PH值大于7，在碱性环境中DNA处于水相，RNA处于有机相。从而分离上清，即可得到DNA

4  请问各位战友，我的PH8.8的 tris的配方是80ml水加18.165gtris碱，调PH值至8.8，可配胶时总是不凝，换别的实验室的PH8.8的tris它就凝了。请问是我的配方问题吗？我都已经重新配置过好几次了，PH值应该是准确的，还有配完后要高压吗？

你的tris不合格，内含氧化性杂质，导致过硫酸铵被大量氧化，请更换。

5  EDTA中文名称为乙二胺四乙酸，是著名的金属螯合剂，

我们常用的抗凝剂主要有两类，

一类是Ca钙离子螯合剂，如柠檬酸钠，柠檬酸钾，草酸钠等，

另一类是生物活性抗凝剂，如肝素等，

当血液中的钙离子被螯合剂结合后，血液因没有钙离子而无法凝结，如果EDTA能够抗凝的话，应该是遵循螯合钙离子，而使血液无法凝固

6  Milli-Qwater

准确的说：

超纯水

是美国Millipore公司Milli-Q Academic A10超纯水系统生产的。

美国Millipore公司Milli-Q Biocel型超纯水系统。最适合细胞培养。全自动操作，产水量为1.2L/min，电阻率18.2MΩ.cm/25℃.总有机碳＜10ppb，热源＜0.001Eu/ml。

美国Millipore公司Milli-Q Academic A10超纯水系统。TOC数字显示，UV灯更换显示，水温显示，定期循环全自动操作，产水量为1.5L/min，电阻率18.2MΩ.cm/25℃.总有机碳＜10ppb,特别适用AA、IC等的微量离子分析

7 乙酸铵的作用：沉淀蛋白质

8

二烷基硫酸钠;K12;AS;SDS;Sodium lauryl sulfate

十二烷基硫酸钠又称K12、AS简称SDS，结构式CH3(CH2)11OSO3Na，分子量288．39。白色至微黄色粉末，微有特殊气体，表观密度0.25g／mL，熔点180～185℃(分解)，易溶于水，HLB值为40．无毒。

用作丙烯酸酯乳液聚合的阴离子表面活性剂。贮存于阴凉、通风、干燥的库房内，防火、防水、防潮。

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