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z妲妲

新虫 (小有名气)

[交流] 蛋白质实验中一些试剂的名称和作用 已有3人参与

1楼
1  三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)是一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。例如,在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基,因此可以与醛发生缩合反应。

两种溶液作用机制不同

Triton X-100是一种非离子表面活性剂,有破膜作用

tris-HCl具有缓冲pH值作用,是一种碱性裂解液

   2  Triton X-100 (曲拉通 X-100)(磷酸缓冲液) 化学名称为聚乙二醇辛基苯基醚,是一种优异的表面活化剂,润湿及洗涤剂。在免疫组织化学(厚切片) 和免疫细胞化学中,Triton X-100 被用来做细胞破膜剂/细胞通透剂,即在细胞膜上打孔。这样抗体就能进入内与相关的抗原结合了。

Triton X100一般在阻断缓冲液中或稀释缓冲液中使用,基本不用做洗液。使用浓度0.2%。较厚的石蜡切片更应该应用Triton X100,这样可以获得更好的染色背景。

Tris-HCl提供一个一定pH值缓冲环境,它的作用根据其不同的PH有很多作用,可以被用作梯度洗脱液,封闭液,总而言之就是为了控制溶液的PH。

   3  水饱和酚与Tris饱和酚的作用与区别

•以前一直用的试验盒抽提质粒,产量最够应付试验需要;现在因客户要求量比较大,而购买提粒大量提取试剂盒不划算,决定采用手工大提质粒——其中一步是饱和酚处理,差点就直接用了水饱和酚而犯错误了。

  现把收集整理的水饱和酚与Tris饱和酚的作用与区别分享给大家,希望对大家有所帮助:

  1、 水饱和酚(Phenol Water)又叫水平衡酚。水饱和酚的PH小于7,一般是PH为5.0左右,通常与异硫氢酸胍一起使用,用于细胞RNA的提取,在酸性环境中,DNA在酚相,RNA在水相。两者就分开了。

  2、 Tris饱和酚(Tris-phenol)一般PH大于7.8,用于DNA的提取:

 其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。

 而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构。

   同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相。从而分离上清,即可得到DNA

   4  请问各位战友,我的PH8.8的 tris的 配方是80ml水加18.165gtris碱,调PH值至8.8,可配胶时总是不凝,换别的实验室的PH8.8的tris它就凝了。请问是我的配方问题吗?我都已经重新配置过好几次了,PH值应该是准确的,还有配完后要高压吗?

你的tris不合格,内含氧化性杂质,导致过硫酸铵被大量氧化,请更换。

5  EDTA中文名称为乙二胺四乙酸,是著名的金属螯合剂,

我们常用的抗凝剂主要有两类,

一类是Ca钙离子螯合剂,如柠檬酸钠,柠檬酸钾,草酸钠等,

另一类是生物活性抗凝剂,如肝素等,

当血液中的钙离子被螯合剂结合后,血液因没有钙离子而无法凝结,如果EDTA能够抗凝的话,应该是遵循螯合钙离子,而使血液无法凝固

6  Milli-Qwater

准确的说:

超纯水

是美国Millipore公司Milli-Q Academic A10超纯水系统生产的。

美国Millipore公司Milli-Q Biocel型超纯水系统。最适合细胞培养。全自动操作,产水量为1.2L/min,电阻率18.2MΩ.cm/25℃.总有机碳<10ppb,热源<0.001Eu/ml。

美国Millipore公司Milli-Q Academic A10超纯水系统。TOC数字显示,UV灯更换显示,水温显示,定期循环全自动操作,产水量为1.5L/min,电阻率18.2MΩ.cm/25℃.总有机碳<10ppb,特别适用AA、IC等的微量离子分析

7 乙酸铵的作用:沉淀蛋白质

8

二烷基硫酸钠;K12;AS;SDS;Sodium lauryl sulfate

    十二烷基硫酸钠又称K12、AS简称SDS,结构式CH3(CH2)11OSO3Na,分子量288.39。白色至微黄色粉末,微有特殊气体,表观密度0.25g/mL,熔点180~185℃(分解),易溶于水,HLB值为40.无毒。

    用作丙烯酸酯乳液聚合的阴离子表面活性剂。贮存于阴凉、通风、干燥的库房内,防火、防水、防潮。
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pang葡萄

新虫 (初入文坛)


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请问tris饱和酚,应该混匀取还是只取下层?

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-12-19 02:01:34
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杨123321yang

新虫 (初入文坛)


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请问曲拉通X-100( Triton X-100)如何稀释?
3楼2017-03-22 19:22:57
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罗泽顺吉

铜虫 (小有名气)


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送红花一朵
请问 十二烷基硫酸钠的那个分解温度是在空气里的吗?有相关文献不?
4楼2019-04-24 22:02:34
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