[交流] 组织切片的免疫荧光标记实验 已有1人参与

免疫荧光标记技术（immunofluorescence technique）是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。 实验材料        组织样品 试剂、试剂盒        PBS、抗体 仪器、耗材        玻片、加湿盒 实验步骤        1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片，放入玻片盒中（每边放6片），或故湿盒中（载玻片勿相互接触）。 2.  待载玻片达室湿且未干时，铺加PBS于切片上（勿溢出玻片）。 3.  稀释的第一杭体于4℃用微量离心机以13 500 g 离心2 min（每一载玻片上加40~50 μl 抗体，应能盖住切片）。 4.  用与泵相连的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的PBS，并从另一端加上抗体，盖上加湿盒，室温温育1 h。 5.  以PBS冼玻片3次（5 min/次），从切片一端加入新的PBS缓冲液，由另一端吸去旧的缓冲液。 6.  稀释的第二抗体于4℃用微量离心机以13 500 g 离心2 min（每载玻片可加40~50 μl 抗体）。 7.  将第二抗体加于切片上，置加湿盒中室温温育1 h，以PBS洗玻片3次（5 min/次）。 8.  将盖玻片放于纸巾上，滴加1滴Gelvatol 于盖玻片中央。翻过载玻片放于盖玻片上（勿施压），将玻片置工作台上，用铝箔覆盖避光放置30 min，使Gelvatol 凝结。   9.  显微镜下观察结果，或置玻片盒中贮于4℃。 B13D74E.jpg

回复此楼

» 猜你喜欢

• 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? 已经有5人回复
• 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 已经有4人回复
• 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 已经有10人回复
• 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 已经有30人回复
• 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ 已经有13人回复
• 是这周出结果还是下周出结果？ 已经有3人回复
• 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 已经有9人回复
• 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） 已经有4人回复
• 帮忙看看fileCode 已经有13人回复
• 为什么网上很多人说本周 12号出结果 已经有7人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

高级回复