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fykxy_206

木虫 (正式写手)

[交流] 【紧急求助】选用什么样的RT-PCR试剂盒

小弟最近要做RT-PCR,材料是丝状真菌,对做PCR一无所知。麻烦那位帮忙指导一下。
我得思路是想从丝状真菌中先提取RNA,然后反转录为cDNA,接下来做real time PCR。我现在不知道从提取RNA到反转录到cDNA所要用些什么试剂或者试剂盒。
那位做过类似的实验,麻烦指导一二。
最好是把用到的试剂(带品牌或厂家)列出来,我好照着采购。
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★
fykxy_206(金币+5,VIP+0):很好,但是还不够详细,我还不不知道用那个,不过还是谢谢!
提取RNA的试剂盒有很多 看你是用过柱的还是TRNzol 推荐有过柱子的 那样得到的RNA较纯 但是费用可能高 可以用天根的 也可以用TAkara的 都有专门为细菌RNA提取的试剂盒
做反转录的话推荐用TArake的反转录试剂盒 progema的也很好,当然价格也高,也可以买反转录酶,RNA抑制剂,引物,自己拼试剂反转录。
做定量的话建议用TAkara的试剂盒,方法成熟,技术支持也可以  也可用天根的也还不错,最近他们再搞这方面的培训。
由于你以前没有做过,建议都用好一点 的试剂盒,等经验成熟了就可以简化了
2楼2008-12-07 13:07:04
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
fykxy_206(金币+3,VIP+0):谢谢
提RNA你就用天根的DP430 RNAprep pure 细菌总RNA提取试剂盒
反转录用PrimeScript RT-PCR Kit DRR014A 50次 1200.00
定量用SYBRPrimeScript RT-PCR Kit  DRR063S 50*120 2400.00 
3楼2008-12-08 10:53:11
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pigsunny

铜虫 (小有名气)

我觉得天根的还好,但是进口的试剂盒更好
学习成就未来!
4楼2009-08-31 12:14:03
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