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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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luckydog52

木虫 (著名写手)

[交流] 限制行内切酶的酶切反应可以用加 Loading Buffer 之后电泳回收的方法终止反应吗?

我要做一个双酶切的试验,请问在37度 温育3小时后怎么终止反应?

用加 Loading Buffer 之后电泳 试剂盒回收DNA的方法终止反应可以吗》
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

内切酶的说明书会写的,一般一个单位65度20min可以灭活,但有的要更高
但是loading buffer含有SDS的话可以直接中止反应
3楼2008-12-06 23:51:43
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qwky2010

金虫 (著名写手)

65度水浴15分钟,不过直接电泳好像也可以吧,
天道酬勤
2楼2008-12-06 23:06:22
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

看说明书上会写用什么终止反应的 再说不终止也没有什么问题
5楼2008-12-07 13:14:39
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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)

说明书上一般说65度水浴15-20分钟可以使酶失活,
我们经常就是直接电泳,觉得影响不大
6楼2008-12-07 22:26:18
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