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分子筛 杂质 已有2人参与
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分子筛柱子分析蛋白,结束后水相冲洗下来的峰是小分子蛋白吗? 目标蛋白分子量在6K左右,使用柱子是AdvanceBio SEC,130A,2.7um. 流速0.5ml/min。 单一流动相150mM PB (ph=7.0) 每次图谱结束后,用纯水洗柱子,在这个过程中开紫外检测器发现会出来一个很高的峰。高度在1000左右,(样品吸收峰在200左右) 想请教一下这个峰是不是蛋白峰?是不是样品降解产生的杂质峰? |
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walking dead
金虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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分子筛介质分离过程是不存在也不允许存在化学反应的。蛋白和柱子、缓冲液和柱子、缓冲液和蛋白都不存在化学反应。要保证蛋白的活性,不降解蛋白。分子筛分离纯化是大分子先出来,小分子后出来。全排阻的大分子根本不进介质的孔,全渗透的小分子是要进去介质的孔的,出来比较慢,你后面用纯水还能洗出来蛋白那就是全渗透的小分子。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-02-13 17:06:39
wolfman840
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