| 查看: 2621 | 回复: 18 | |||
[交流]
PCR产物酶切连接pET 28a，测序发现引物部分碱基缺一个C
|
|||
|
最近实验一直不顺利，各种突变和缺失，累觉不爱。 上游引物加了保护碱基和Ndel/Xbal酶切位点，引物开头是5’-tctagaCATATGGCCAG......... 测序回来，峰图很干净，完全没有套峰。  突变的碱基就不管了，但是开头CATATGGCAG， 少了个C！！！后面都乱码了，跪。。。。。  问了生工测序，也回答说测序没问题。 我觉得也不该是KOD酶的问题吧，毕竟在引物上呢，也能突变缺失吗？会不会是引物本身少了C导致的，虽然检测报告写的正常。 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有96人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2016-12-06 16:39:26
2楼2016-12-06 14:21:46
3楼2016-12-06 15:04:19
5楼2016-12-06 18:27:53
sky蒲公英
版主 (文坛精英)
- 应助: 177 (高中生)
- 贵宾: 15.664
- 金币: 119295
- 散金: 13465
- 红花: 300
- 沙发: 1428
- 帖子: 19480
- 在线: 5618.4小时
- 虫号: 3384889
- 注册: 2014-08-27
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
- 管辖: 文献求助
6楼2016-12-06 18:37:40
7楼2016-12-06 22:27:01
sky蒲公英
版主 (文坛精英)
- 应助: 177 (高中生)
- 贵宾: 15.664
- 金币: 119295
- 散金: 13465
- 红花: 300
- 沙发: 1428
- 帖子: 19480
- 在线: 5618.4小时
- 虫号: 3384889
- 注册: 2014-08-27
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
- 管辖: 文献求助
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-07 06:25:57
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-07 06:25:57
|
不是，我的是插入片段。在测序结果刚开始的10bp里多。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2016-12-06 22:30:14
sky蒲公英
版主 (文坛精英)
- 应助: 177 (高中生)
- 贵宾: 15.664
- 金币: 119295
- 散金: 13465
- 红花: 300
- 沙发: 1428
- 帖子: 19480
- 在线: 5618.4小时
- 虫号: 3384889
- 注册: 2014-08-27
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
- 管辖: 文献求助
9楼2016-12-06 22:31:11
kungfu2016
新虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 3370.9
- 红花: 1
- 帖子: 558
- 在线: 56.5小时
- 虫号: 4548567
- 注册: 2016-03-28
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-07 06:26:49
Ivy尘: 金币+1 2016-12-07 09:37:15
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-12-07 06:26:49
Ivy尘: 金币+1 2016-12-07 09:37:15
|
引物本身有问题吧 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-12-06 23:01:31