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新虫 (小有名气)

[求助] 端粒酶问题求助,xie xie

最近在做有关端粒酶实验,自己在癌细胞里提取得端粒酶用来延伸引物DNA进行电泳跑胶,提取端粒酶后,加入20ul,10umDNA引物,5ul端粒酶提取物,95ul延伸缓冲液,37度下延伸1h,但是跑出来的电泳图都显示引物DNA没被延伸,还是引物DNA原有碱基条带(引物DNA54个碱基,文献上延伸1h的话会涨到80个碱基左右)。。。     要么就是直接没有任何条带了,各位如果有接触这方面实验的可否指点一二,我用的聚丙烯酰胺凝胶电泳,TBE缓冲液,1孔为因为DNA,2,3为延伸获得引物DNA,可以看出没被延伸,5,6孔为提取的端粒酶跑出的条带,最后一空为LDDERN DNA ,谢谢希望有人帮忙。。。。。。真心谢谢,好事连连,幸运多多,事试顺利哈。。。

端粒酶问题求助,xie  xie
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不以物喜,不以己悲。
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本真扬厉

金虫 (小有名气)

你用的引物和延长缓冲溶液是什么?我用的引物是18个碱基,大多数文献中用的引物都是这个18个碱基的,另外缓冲溶液也是影响反应的一个忽略的因素
真诚打动你!
5楼2017-07-13 08:20:59
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小小小曼ing

新虫 (初入文坛)

我也没做出来,怎么回事?
2楼2017-03-22 08:45:02
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amber流河

金虫 (初入文坛)

我也在做这个 同学你做出来了吗 求帮助啊
3楼2017-05-17 10:12:20
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韩会会

新虫 (初入文坛)

同求帮助啊,我想问一下细胞裂解液大家都是从哪买的啊?
4楼2017-05-22 09:43:27
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