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yuer8139

银虫 (小有名气)

[交流] 求助RT-PCR

头一次做RT-PCR,电泳后没有条带,想让大家帮忙看看,提些建议,谢谢大家,辛苦你们了。
我想做三个基因:survivin   bcl-2.     actin
  

SVV引物:     
P1-primer:  5'-GGGACCCGTTGGCAGAG-3';    P2-primer : 5'-AAAATGAGCCCCCAAAAAAGA-3',预计扩增产物长度727bp;

B C L-2 引物:
5-G AT G G C G CA C G C T G G G A G A A-3`
5`-C A C C A C C G T G G C A A A G C G T C-3`

PCR反应条件:94℃  2min   94℃30s    50℃30s    72℃1min 35个循环。72℃延伸7min

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-2 at 12:11 ]
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

…………

[ Last edited by wjswj on 2008-12-5 at 14:01 ]
金币是赌出来的
2楼2008-12-05 13:59:22
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

GC都有点多吧
金币是赌出来的
3楼2008-12-05 14:01:39
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eaglezheng

铁虫 (小有名气)

引物好像有点问题
4楼2008-12-05 19:50:30
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fykxy_206

木虫 (正式写手)

P2-primer : 5'-AAAATGAGCCCCCAAAAAAGA-3'
很有问题  3‘端A太多了 配对不牢 无法延伸
5楼2008-12-05 20:07:39
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yuer8139

银虫 (小有名气)

谢谢大家的帮忙。引物是从文献上找的呢,同学说有的文献是故意写错的,真的是这样啊?
6楼2008-12-05 22:16:55
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