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金色的尾巴

新虫 (小有名气)

[求助] 求助:如何成功制备小分子单克隆抗体 已有1人参与

求助大家,有没有做过或了解小分子单克隆抗体的制备的,如何使制备更容易成功。。。
现在在做四环素的单抗,四环素偶联的BSA,但是三免之后的效价都不是很好,求有经验的前辈给我些建议,如何更好的设计方案验证血清的效价,以及如何更好制备。。。

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shenhaiwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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用四环素偶联KLH进行免疫,用四环素偶联BSA进行检测

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2楼2016-11-29 19:39:12
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金色的尾巴

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by shenhaiwang at 2016-11-29 19:39:12
用四环素偶联KLH进行免疫,用四环素偶联BSA进行检测

您是指自己去合成偶联KLH的全抗原,还是有这种全抗原卖。。
您觉得偶联BSA的四环素,是不是基本很难产生针对四环素小分子的抗体。。
目前用偶联OVA的四环素包板,然后测效价。不过是其他人合的,测出来的结果基本没有效价。可能是包板抗原没合好,也可能是根本没合成四环素抗原,唉,期盼您得多多给我一些建议和分析。

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3楼2016-12-01 10:25:13
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shenhaiwang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 金色的尾巴 at 2016-12-01 10:25:13
您是指自己去合成偶联KLH的全抗原,还是有这种全抗原卖。。
您觉得偶联BSA的四环素,是不是基本很难产生针对四环素小分子的抗体。。
目前用偶联OVA的四环素包板,然后测效价。不过是其他人合的,测出来的结果基本没 ...

一般自己合成四环素的全抗原就可以,四环素上有氨基,很容易和载体蛋白进行偶联。偶联成功后,产生针对四环素的抗体还是很有可能的。可以买一点四环素的抗体,来检测一下四环素是否偶联成功。偶联全抗原确定是合格后,再进行免疫或者进行检测。
4楼2016-12-05 20:24:15
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