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liumikewolf

金虫 (小有名气)

[交流] 质粒pcr产物中除目的产物以外,有一些其他条带,请问是什么原因?

质粒pcr产物中除目的产物以外,有一些其他条带,请问是什么原因?这些杂带可不可能是大肠杆菌基因组引起的非特异性扩增?因为质粒提取难免会有少量的基因组dna。大家有分析过这种情况吗?亟待解决!!!!!!!
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

不充一句,质粒提取用的试剂盒,电泳没有监测到基因组污染
2楼2008-12-04 18:03:47
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

引物特异性不好
帮助虫友,提升自己
3楼2008-12-05 04:27:54
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by charon1982 at 2008-12-5 04:27:
引物特异性不好

我明白你的意思,那么引物特异性不好是否与大肠基因组有关?因为该引物是根据另外一种细菌基因组设计的.
4楼2008-12-05 08:38:03
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yuyixst

木虫 (正式写手)

去比对一下看看了
5楼2008-12-05 09:26:35
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j2

木虫 (正式写手)

电泳没有监测到基因组污染 ?不可能是pcr过程受污染吗?
修炼ing,当虫仙……
6楼2008-12-05 09:38:39
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liumikewolf

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by j2 at 2008-12-5 09:38:
电泳没有监测到基因组污染 ?不可能是pcr过程受污染吗?

因为有阳性阴性对照,所以pcr结果是准确的.
7楼2008-12-05 10:03:36
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

那要看你的非特异带是 多大的  带 只要有目的带你切胶回收不就可以了么
你可以试试把模板的量加少一点在扩
8楼2008-12-05 19:14:50
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