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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 考马斯亮兰法测定全菌中总蛋白含量
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)

[求助] 考马斯亮兰法测定全菌中总蛋白含量 已有1人参与

现在想用考马斯亮蓝法测定菌体中总蛋白含量  请问应该如何去测？
菌样应该如何处理？是取一定量的菌液然后煮沸变性吗？
那么煮沸后是取上清测定还是不用离心直接稀释测定就好？

求大神帮忙！
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1楼 2016-11-28 09:21:21
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十四_14

荣誉版主 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小冀- at 2016-11-28 17:51:13
我们测定的时候是破碎了，直接测，没有煮沸变性这一步；如果你做煮沸变性，还要测全细胞蛋白总量的话，应该不用离心

也就是说破碎液你们也没有离心是吗？
因为跑全菌电泳的时候是先加buffer煮沸嘛~所以我就想煮沸来破碎细胞~

还想请教一下  你们是否有测过包涵体沉淀的蛋白含量呀？？
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5楼2016-11-29 14:20:36
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夏侯轻衣
qun

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-11-28 12:27:17
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
十四_14: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢~~~ 2016-11-29 14:18:23
我们测定的时候是破碎了，直接测，没有煮沸变性这一步；如果你做煮沸变性，还要测全细胞蛋白总量的话，应该不用离心
赞一下 回复此楼
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4楼2016-11-28 17:51:13
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by 十四_14 at 2016-11-29 14:20:36
也就是说破碎液你们也没有离心是吗？
因为跑全菌电泳的时候是先加buffer煮沸嘛~所以我就想煮沸来破碎细胞~

还想请教一下  你们是否有测过包涵体沉淀的蛋白含量呀？？...

没有测过含量

发自小木虫Android客户端
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6楼2016-11-29 17:49:45
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