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adam.jianlei

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 【重金求解】蛋白加热后测定的分子量增大了一点点,求合理的解释? 已有1人参与

现在在研究一种蛋白(~80 KDa)的热稳定性,发现在PBS溶液中加热后,用MALDI-TOF测定蛋白分子量增大了~200 Da。
跪求合理的解释。
不胜感激
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zinfly

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
80kD你是根据多电荷算出来的么?
个人推测,或许是PBS导致他带的电话有差别,
2楼2016-11-28 11:50:27
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adam.jianlei

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zinfly at 2016-11-28 11:50:27
80kD你是根据多电荷算出来的么?
个人推测,或许是PBS导致他带的电话有差别,

都是MALDI测出来的,加热后的比未处理的大了200Da。编辑让解释为什么会增加?
3楼2016-11-28 12:24:36
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adam.jianlei

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zinfly at 2016-11-28 11:50:27
80kD你是根据多电荷算出来的么?
个人推测,或许是PBS导致他带的电话有差别,

对了,测MALDI时,样品都经过透析脱盐后再测定的
4楼2016-11-28 12:28:46
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xiaoLifeiD

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
会不会受热团聚了?你用粒度仪测过么?加热后分子尺寸变大了没有?

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5楼2016-11-29 06:05:36
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adam.jianlei

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-11-29 06:05:36
会不会受热团聚了?你用粒度仪测过么?加热后分子尺寸变大了没有?

测过粒径,有二聚体。如果是二聚体分子量回加倍,而不是增加一点点。还有其他可能的原因么?

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6楼2016-11-29 07:12:54
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adam.jianlei

铁杆木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaoLifeiD at 2016-11-29 06:05:36
会不会受热团聚了?你用粒度仪测过么?加热后分子尺寸变大了没有?

假设是分子变大且没有聚集,会影响MALDI-TOF中的飞行时间吗?求解,不胜感激
有参考文献最好
7楼2016-11-29 08:01:42
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