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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切无条带
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shi6625893

金虫 (小有名气)

[交流] 酶切无条带 已有4人参与

各位虫友，我构建了一个质粒PCR验证p出正确条皮带，但单酶切却什么也看不到，如果没有该酶切位点，连质粒的条带也没有，不知是怎么回事？
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1楼 2016-11-26 19:56:36
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ULYSSEESWB

铁杆木虫 (正式写手)
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kuaile5420: 金币+1, 欢迎交流 2016-11-30 22:32:12
先把质粒提出来 跑出来再说
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5楼2016-11-28 10:36:13
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小威斯

铁虫 (小有名气)
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kuaile5420: 金币+1, 欢迎交流 2016-11-30 22:31:51
P出来直接送测序
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2楼2016-11-27 15:23:37
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

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我也遇到这种情况了，重复了好多次

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知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
3楼2016-11-27 23:03:51
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金虫 (正式写手)
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kuaile5420: 金币+1, 欢迎交流 2016-11-30 22:32:01
改变酶切时间试一下，切得时间长一些
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生活活生生累死
4楼2016-11-28 08:23:20
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shi6625893

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-11-27 23:03:51
我也遇到这种情况了，重复了好多次

然后切出来了吗，怎么做的
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6楼2016-11-28 11:05:37
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

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kuaile5420: 金币+1, 欢迎交流 2016-11-30 22:32:24
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6楼: Originally posted by shi6625893 at 2016-11-28 11:05:37
然后切出来了吗，怎么做的...

第一个质粒过夜酶切，有目的条带了。测序结果也对了。第二个切了N次都没有带。你可以试试换个酶，单酶切看看。

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知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
7楼2016-11-28 11:55:01
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shi6625893

金虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-11-28 11:55:01
第一个质粒过夜酶切，有目的条带了。测序结果也对了。第二个切了N次都没有带。你可以试试换个酶，单酶切看看。
...

没有酶切出来的那个看得见质粒条代码，提出的质粒浓度大吗
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8楼2016-11-29 18:43:32
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

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8楼: Originally posted by shi6625893 at 2016-11-29 18:43:32
没有酶切出来的那个看得见质粒条代码，提出的质粒浓度大吗...

看得见，带也很亮

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知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
9楼2016-11-29 20:47:18
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shi6625893

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ULYSSEESWB at 2016-11-28 10:36:13
先把质粒提出来 跑出来再说

提出来了，但跑不出来
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10楼2016-12-06 17:58:39
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