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请教Thermo Scientific系列的限制性内切酶双酶切相关问题
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质粒5998bp EcoRⅠ酶切位点 1149,1196;HindⅢ酶切位点 1 EcoRⅠ与HindⅢ双酶切反应体系 本人所用体系: 超纯水 11.4μL Buffer R 2μL DNA 5μL EcoRⅠ 0.8μL HindⅢ 0.8μL V总=20μL 涡旋几秒混匀,37°C孵育3h,4°C保存; 对于限制酶加入的顺序及反应时间本人不是很清楚,网站上查不到,请有做过这方面的指点一下 |
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