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g_olden铁虫 (初入文坛)
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[求助]
用逆向蒸发法制备包裹荧光素脂质体的问题
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目前正在用逆向蒸发法做脂质体遇到了一些问题，由于周围没人做这个，所以只能来论坛求助了： 我目前只是在做空白脂质体，目前的配方是大豆卵磷脂（购于TCI）30mg，胆固醇（稳定与维生素E中）（购于TCI）5mg， 步骤一：置于50ml茄型瓶中旋蒸除去有机溶剂，形成薄膜后用3ml乙醚溶解薄膜，加入超纯水1ml，油水比为3:1，冰浴下探头超声（1s开1s停，40w,3min），超声后可以得到均一的乳液，静置2小时都不分层。然后将乳液置于50ml茄型瓶，200rpm，25度的条件下旋蒸除去有机溶剂。 步骤二：直接将磷脂与水混合在一起探头超声，条件相同，只是旋蒸的温度调到45度。 遇到的问题是： 在后来的旋蒸除去有机溶剂中，无论是哪种步骤，旋蒸到最后的胶态都粘在了瓶底，并且加了5mlPBS洗脱液继续减压旋蒸也下不来，并且时间蒸长了就会变成一块块的块状白色固体黏附在瓶底，始终都没有看到凝胶塌陷的现象。 但是用步骤一的方法做的时候，胶态物质可以在水域超声下被洗下来，形成溶液，但是这个是脂质体么？因为没观察到凝胶塌陷，就没去测TEM。不敢确定自己目前做的是不是脂质体。 另外，我想求助一下，如果有上海或者离上海比较近的城市的同学有做这个的，可否留下联系方式，我可以去你们那里看一下你们做脂质体的过程。。。 |
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