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小mao同学

铁虫 (初入文坛)

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专业: 机械工程

[求助] 制备DC细胞，T细胞已有1人参与

机械学术，请教外周血如何分离分化得到DC细胞，T细胞。

DC细胞：取志愿者外周血，肝素抗凝，ficoll（1.077g／mL）密度梯度离心，取界面层细胞，PBS 洗涤；加入AIM-V 培养基，
100％湿度、37℃、5％ CO2培养箱中孵育1．5 ～ 2．0 h，去悬浮细胞，加入AIM-V 培养基及rhGM-CSF 800 U／mL 和
IL-4 500 U／ mL，每48 小时更换培养基并补加上述两种细胞因子；第5 天加入TNF-α 250 U／ mL，继续培养至第7 天DC 成熟。
制备淋巴细胞，取供者外周血，方法同上取悬浮细胞，D-Hank′s 液洗涤，加入处理好的尼龙毛柱，孵育1．0 h；用37℃ D-Hank′s 液
冲洗出游离细胞，即T 淋巴细胞。

以上是我从中文文献中找到的获取细胞的办法。疑问之处在于“去悬浮细胞”是否笔误？请研究细胞免疫的前辈指导，是否还有其他制备方法。

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