应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 菌液PCR阳性
152/2返回列表上一页12
查看: 1907  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

不吃M的鱼

金虫 (小有名气)
假阳性吧，做菌落PCR的时候我通常一端用载体上的引物，一端用基因上的特异性引物。这样做基本没什么假阳性。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
11楼2016-11-25 18:19:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mailmrcai

铜虫 (正式写手)
单独的质粒跑个胶看看，菌液pcr假阳性还是挺高的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
Comeon！
12楼2016-11-25 23:11:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物狗-哈

新虫 (初入文坛)
可能是菌液鉴定时的假阳性，有时候平板上的PCR产物也可能会被扩增出来。我用的Clonexpress，这个试剂盒成功率非常高，一般第二天就可以拿到克隆，阳性率也相当的高。
赞一下 回复此楼
13楼2016-12-28 15:48:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangxp2006

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

菌液PCR最好选用载体一端引物和目的片段一段引物扩增，扩初来的很亮的条带，基本上可以确定已经构建到载体上了。直接用目的片段两端引物扩增，假阳性非常高
赞一下 回复此楼
14楼2016-12-28 20:38:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

涯天一方

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by bobmeng2 at 2016-11-25 00:05:46
应该不是质粒浓度的问题。稀释之后还是没有p出，然后对照就是拿之前连过相似片段的质粒做的，浓度也很高。。不过现在重新扩增了片段，重新连得，已经得到阳性结果了。谢谢大家
...

我已经连了好多次了，质粒就是比预期的要小，酶切后也只有一条带，用该质粒为模板做pcr，却p不出条带，是什么原因呢
赞一下 回复此楼
15楼2017-07-07 00:26:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bobmeng2 的主题更新
152/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:49 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 16:25 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:12 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:00 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:01 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:00 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 10:01 by 23jxep3nCNZb
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
[基金申请] 面上有专家说实验设备不是我们单位的 +6 zj_muchong 2026-09-08 8/400 2026-09-11 06:56 by suifengdao
[有机交流] 科研求助 10+4 我吃一只鱼 2026-09-07 4/200 2026-09-10 08:32 by 0940628
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭