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菌液PCR阳性 已有3人参与
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各位大神，我最近在构建质粒的过程中，想将一个片段连到载体上，连接体系转化大肠后做以菌液为模板pcr能扩增到目的片段，但是抽质粒后以质粒为模板就扩不出来了。。目的片段比较小，只有150bp左右。。求大神指导 发自小木虫Android客户端 |
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应该不是质粒浓度的问题。稀释之后还是没有p出，然后对照就是拿之前连过相似片段的质粒做的，浓度也很高。。不过现在重新扩增了片段，重新连得，已经得到阳性结果了。谢谢大家 发自小木虫Android客户端 |
9楼2016-11-25 00:05:46
MAS_rice
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2楼2016-11-21 22:52:31
小冀-
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-24 05:30:34
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不会菌液pcr扩出来的是基因组上的吧？还有就是质粒pcr的时候质粒不要加太多 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-11-21 23:13:39
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xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-24 05:30:50
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-24 05:30:50
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有的，阳性对照是拿之前连上相类似片段的质粒做模板，阴性对照是p不出片段的，然后抽完样品质粒做模板就p不出。。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-11-22 12:50:21