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bobmeng2

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌液PCR阳性 已有3人参与

各位大神,我最近在构建质粒的过程中,想将一个片段连到载体上,连接体系转化大肠后做以菌液为模板pcr能扩增到目的片段,但是抽质粒后以质粒为模板就扩不出来了。。目的片段比较小,只有150bp左右。。求大神指导

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bobmeng2

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by yakun123 at 2016-11-24 01:18:48
楼主 结果怎么样了,是因为质粒浓度问题吗

应该不是质粒浓度的问题。稀释之后还是没有p出,然后对照就是拿之前连过相似片段的质粒做的,浓度也很高。。不过现在重新扩增了片段,重新连得,已经得到阳性结果了。谢谢大家

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9楼2016-11-25 00:05:46
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MAS_rice

至尊木虫 (著名写手)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-24 05:30:22
有没有对照?

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竹杖芒鞋轻胜马,谁怕,一蓑烟雨任平生;回首向来萧瑟处,归去,也无风雨也无晴
2楼2016-11-21 22:52:31
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-24 05:30:34
xn8008: 应助指数+1 2016-11-24 05:30:41
不会菌液pcr扩出来的是基因组上的吧?还有就是质粒pcr的时候质粒不要加太多

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···
3楼2016-11-21 23:13:39
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bobmeng2

新虫 (初入文坛)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-24 05:30:50
引用回帖:
2楼: Originally posted by MAS_rice at 2016-11-21 22:52:31
有没有对照?

有的,阳性对照是拿之前连上相类似片段的质粒做模板,阴性对照是p不出片段的,然后抽完样品质粒做模板就p不出。。

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4楼2016-11-22 12:50:21
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