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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助磷酸盐缓冲液的配制方法 急！
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juntao

金虫 (小有名气)

[交流] 求助磷酸盐缓冲液的配制方法 急！

我想配制10mM的磷酸盐（磷酸钠盐或者钾盐）缓冲液，pH最好能在3-12这个范围内，我不是专门做生物的，不是很懂，还请知道的虫虫不吝赐教~

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:10 ]
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1楼 2008-12-03 16:43:20
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liubang8355

金虫 (小有名气)
★ ★
juntao(金币+2,VIP+0):谢谢
以下是具体配方：以100毫升0.2摩尔PH为7的为例磷酸氢二钠和磷酸二氢钠的缓冲液
用时稀释20倍就可以。（微生物实验一般情况PH为7）
A称取7.164克12水合磷酸氢二钠，加水定容到100毫升。
B称取3.121克1水合磷酸二氢钠，加水定容到100毫升。
取A液61毫升，B液39毫升混合即为100毫升0.2摩尔PH为7的为例磷酸氢二钠和磷酸二氢钠的缓冲液。
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2楼2008-12-03 17:43:34
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cynjau

金虫 (小有名气)
★ ★
juntao(金币+2,VIP+0):谢谢 我很需要那张表的
你上网查一下，我想找那张表，可是没有找到
你要记得必须要用超纯水配要不灭菌会浑浊的
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3楼2008-12-03 17:45:04
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liubang8355

金虫 (小有名气)
★ ★
juntao(金币+2,VIP+0):我没有相关的书籍啊 ,麻烦帮找下
此配方较为常用，各种资料上都有，PH也较为准确，你可以查阅相关实验书籍的附录，一般都有哈。
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4楼2008-12-03 17:45:44
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ieg1983

磷酸钠缓冲溶液的配制

★ ★ ★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
amisking(金币+2,VIP+0):支持一下！ 6-14 15:59
pH        1 mol/L Na2HPO4 的体积/ml        1 mol/L NaH2PO4 体积/ml
5.8        7.9                                                       92.1
6        12                                                        88
6.2        17.8                                                      82.2
6.4        25.5                                                      74.5
6.6        35.2                                                      64.8
6.8        46.3                                                      53.7
7        57.7                                                      42.3
7.2        68.4                                                     31.6
7.4        77.4                                                     22.6
7.6        84.5                                                     15.5
7.8        89.6                                                     10.4
8        93.2                                                      6.8

配成的缓冲溶液为1M，你可以根据需要将混合后的溶液稀释至你所需要的浓度。
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5楼2008-12-04 09:26:26
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xiaochong0101

铜虫 (小有名气)
★
juntao(金币+1,VIP+0):谢谢参与 5-27 09:37
配方好找的，但是要注意水要提前灭菌，试剂瓶也要高温灭菌后烘干，不然即使放在4度，一周就会长出絮状沉淀的。
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6楼2008-12-04 10:22:24
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030070316

金虫 (小有名气)
★
juntao(金币+1,VIP+0):谢谢参与 5-27 09:37
配完后再去灭菌可以吗？
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7楼2008-12-04 11:53:50
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biomater

银虫 (著名写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
可以配完了，：倒入溶液瓶（大的吊针瓶）内，盖上胶帽，并插上针头放入高压锅内 8 磅 消毒 20 分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。！那张表我有，给我你的邮箱，发给你！
1．
1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。
2．
1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。
3.
pH        1/15Mol/L Na2HPO4        1/15Mol/L KH2PO4       
5.8        8.0        92.0       
5.9        9.9        90.1       
6.0        12.2        87.8       
6.1        15.3        84.7       
6.2        18.6        81.4       
6.3        22.4        77.6       
6.4        26.7        73.3       
6.5        31.8        68.2       
6.6        37.5        62.5       
6.7        43.5        56.5       
6.8        49.6        50.4       
6.9        55.4        44.6       
7.0        61.1        38.9       
7.1        66.6        23.4       
7.2        72.0        28.0       
7.3        76.8        23.2       
7.3        80.8        19.2       
7.5        84.1        15.9       
7.6        87.0        13.0       
7.7        89.4        10.6       
7.8        91.5        8.5       
7.9        93.2        6.8       
8.8        94.7        5.3       
8.1        95.8        4.2       
8.2        97.0        3.0       
8.4        98.0        2.0

[ Last edited by biomater on 2008-12-4 at 21:47 ]
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焚琴煮鹤岂不快哉。。。。。。
8楼2008-12-04 12:21:47
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lone-1012

银虫 (正式写手)
直接用刚制的超纯水配置，依然要灭菌吗？
怎么灭菌？
不是学生物的，所以不太懂。
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9楼2008-12-18 21:40:29
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Sophya1982

★ ★
juntao(金币+1,VIP+0):谢谢参与 5-27 09:37
juntao(金币+1,VIP+0):谢谢参与 5-27 09:37
請問xiaochong0101 為何配置的水要先消毒?
放置在4度冰箱內一週內出現的棉絮現象又是什麼?污染嗎???
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10楼2009-03-12 07:46:02
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