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人血提取RNA 已有1人参与
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第一大步:从用人淋巴细胞分离液从血液中提取细胞。 第二步:用trozol 法提取细胞中的RNA 。 想问的问题: 1、提取淋巴细胞是一定要在无菌环境吗？在平常的实验环境可以操作吗？(分离液用注射器抽取，不会被污染) 2、提rna 时，最后乙醇洗涤后，可以用50μl water+ 1ul 的RNase inhibitor 代替传统的DEPC 水溶解rna吗？ 发自小木虫Android客户端 |
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cory0931
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【答案】应助回帖
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2016-11-22 22:07:51
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个人觉得， 不需要非常严谨的进行无菌操作，毕竟淋巴细胞分离，也就半小时的事情，细菌及时感染、生长，也长不了多少； 但是考虑到荧光定量的精确性，及时平常环境中极少的外来污染，都可能造成实验结果的不精确，因此如有条件，还是进行无菌操作要可靠一些。 理论上分析，你的溶解液是可以的，毕竟有RNA抑制剂存在；但是更好一点的做法可能是： 灭菌水+抑制剂，或者 DEPC处理水+抑制剂 更好一些的做法是，提取RNA以后，及时做反转录，再以cDNA的形式储存起来。 |
2楼2016-11-19 23:17:29
3楼2016-11-22 12:41:56
pyj809132105
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4楼2016-11-22 21:32:07