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11persevere

新虫 (初入文坛)

[求助] WB 已有5人参与

条带分不清楚，背景高怎么解决

WB


WB-1


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1楼 2016-11-18 21:42:38
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何海滨

新虫 (初入文坛)
不能把它剪开吗？

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2楼2016-11-19 10:03:44
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何海滨

新虫 (初入文坛)
背景高，可能是封闭不完全

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3楼2016-11-19 10:04:19
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11persevere

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 何海滨 at 2016-11-19 10:03:44
不能把它剪开吗？

谢谢您的回答，我做的是全菌体蛋白，蛋白条带很多，主要看有没有抗原性，怎么解决WB条带分不开的问题

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4楼2016-11-19 16:40:36
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你太善良

新虫 (著名写手)
看下跑的pagepage图吗。感觉page就跑的不怎么好

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5楼2016-11-19 19:47:51
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11persevere

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 你太善良 at 2016-11-19 19:47:51
看下跑的pagepage图吗。感觉page就跑的不怎么好

这是之前跑的page图，12%分离胶
WB-2



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6楼2016-11-19 21:38:53
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amxinyu

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
条带分不清楚，要减小上样量，WB灵敏度更高；背景深可能的原因：封闭时间短，一抗时间不宜过长，增加洗膜时间及次数；希望对你的实验有帮助。
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上善若水
7楼2016-11-20 11:14:09
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11persevere

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by amxinyu at 2016-11-20 11:14:09
条带分不清楚，要减小上样量，WB灵敏度更高；背景深可能的原因：封闭时间短，一抗时间不宜过长，增加洗膜时间及次数；希望对你的实验有帮助。

谢谢你，一抗4度过夜处理的，时间算长吗？

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8楼2016-11-20 16:51:03
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amxinyu

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 11persevere at 2016-11-20 16:51:03
谢谢你，一抗4度过夜处理的，时间算长吗？
...

可以试试过夜封闭，一抗室温2-4小时，或参考抗体说明书，看下抗体浓度选择是否合适。
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上善若水
9楼2016-11-21 22:34:25
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11persevere

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by amxinyu at 2016-11-21 22:34:25
可以试试过夜封闭，一抗室温2-4小时，或参考抗体说明书，看下抗体浓度选择是否合适。...

再次感谢，我抗体是1:1000稀释的，4度过夜也是按照说明来的，是不是蛋白的浓度越大，转到膜上的条带就越深？

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10楼2016-11-23 09:24:58
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