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ztt2015

新虫 (小有名气)

引用回帖:
1楼: Originally posted by fxy0570 at 2016-11-16 10:36:39
关于 PET22B基因翻译问题,我有个基因想插入到PET22B中,使用NdeI t和XhoI,,我的基因前面的酶切位点是NdeI ,后面是 XhoI,我看PET22B中的NdeI t和XhoI,分别是288和158,这样会不会读反啊,可是设计的时候就是这样 ...

目标蛋白前加TEV酶酶切位点,蛋白纯化后用酶把前面的切掉就可以了。

发自小木虫Android客户端
11楼2016-11-19 20:17:44
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迷路人啊

新虫 (小有名气)

不加信号肽蛋白大部分都在胞内   如果可以不分泌那么直接用pet其他系列载体

发自小木虫IOS客户端
12楼2016-11-20 18:40:56
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WilliamHJ

金虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by fxy0570 at 2016-11-17 11:13:01
不是这个问题,问题是蛋白上不能有甲硫氨基酸...

你可以用融合表达然后再切掉吧

发自小木虫Android客户端
学习中
13楼2016-11-22 00:26:21
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fxy0570

金虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by WilliamHJ at 2016-11-22 00:26:21
你可以用融合表达然后再切掉吧
...

是的,要么重新加信号肽,要么加融合蛋白
14楼2016-11-22 10:07:15
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