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wangliyc

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌种活化问题 已有3人参与

购买的粪链球菌冻干菌种,按照说明,溶解冻干菌粉后,将菌悬液转接到TSA平板进行活化24h,这是第一代。从第一代平板上取菌转接到TSA平板上,培养24h,这是第二代,以此类推,活化到三代后。接种到PSE选择性培养基上,一个菌都没长。请问是不是每一代活化的时间不够?还是方法不对,需要摇床?
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大美妞科学家

金虫 (正式写手)

你可以把tsa上的菌镜检一下 看看是不是球菌 不是的话就从菌悬液里重新划 或者直接从菌悬液划选择性培养基 一般五代之内的菌都没问题 不是中途污染了就是原菌种就有问题 还有你的培养基是否做过验证也是问题

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4楼2016-11-15 19:00:30
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小冀-

版主 (著名写手)

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wangliyc: 金币+1 2016-11-16 12:03:19
活化时间足够了,我们一般最多转两次,选择条件没错的话可能就是菌出问题了
···
2楼2016-11-15 17:55:51
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jql81070305

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wangliyc: 金币+1 2016-11-16 12:04:07
只要菌悬液了,证明你方法是对的~有可能菌种错了~也有可能你过程污染了~你直接菌悬液划PSE选择性培养基就行了~
3楼2016-11-15 18:02:53
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wangliyc

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 大美妞科学家 at 2016-11-15 19:00:30
你可以把tsa上的菌镜检一下 看看是不是球菌 不是的话就从菌悬液里重新划 或者直接从菌悬液划选择性培养基 一般五代之内的菌都没问题 不是中途污染了就是原菌种就有问题 还有你的培养基是否做过验证也是问题
...

准备镜检了。从菌悬液接种到选择性培养基上也不长,咨询购买单位,需要活化到2-3代,才有活性。培养基也已经买了其他厂家的,对比一下。
5楼2016-11-16 12:02:07
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wangliyc

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jql81070305 at 2016-11-15 18:02:53
只要菌悬液了,证明你方法是对的~有可能菌种错了~也有可能你过程污染了~你直接菌悬液划PSE选择性培养基就行了~

直接菌悬液划PSE也不长
6楼2016-11-16 12:03:57
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大美妞科学家

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wangliyc at 2016-11-16 12:02:07
准备镜检了。从菌悬液接种到选择性培养基上也不长,咨询购买单位,需要活化到2-3代,才有活性。培养基也已经买了其他厂家的,对比一下。...

培养基可以用进口的 会好很多 之前我们难长的菌用进口的就会好很多 要是真是菌少的话你可以用菌悬液直接涂布 你确定自己没污染 那就是你买的菌种的问题 可以找他们换

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

7楼2016-11-16 12:11:59
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wangliyc

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 大美妞科学家 at 2016-11-16 12:11:59
培养基可以用进口的 会好很多 之前我们难长的菌用进口的就会好很多 要是真是菌少的话你可以用菌悬液直接涂布 你确定自己没污染 那就是你买的菌种的问题 可以找他们换
...

培养基原来用的百思的,现在又买了北京路桥的了,等到了试一下。用三代菌制作的菌悬液涂布到PSE上也没长。看平板上的菌落形态,都是一个类型的,应该不会污染吧?会不会有这种情况,溶解冻干粉的时候受污染,活化的时候培养基上长得是污染的菌,不是粪肠球菌?
8楼2016-11-16 12:19:35
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大美妞科学家

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by wangliyc at 2016-11-16 12:19:35
培养基原来用的百思的,现在又买了北京路桥的了,等到了试一下。用三代菌制作的菌悬液涂布到PSE上也没长。看平板上的菌落形态,都是一个类型的,应该不会污染吧?会不会有这种情况,溶解冻干粉的时候受污染,活化的 ...

有可能啊 菌种中心会有这种情况发生 但是一般很难长的菌要是操作不小心 打管的时候就污染了 那长出来的全是杂菌也不奇怪……
我们都用路桥的 进口的用BD的 感觉粪肠球菌应该还行啊 培养条件没问题?

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9楼2016-11-16 12:32:50
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jql81070305

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by wangliyc at 2016-11-16 12:02:07
准备镜检了。从菌悬液接种到选择性培养基上也不长,咨询购买单位,需要活化到2-3代,才有活性。培养基也已经买了其他厂家的,对比一下。...

这个跟活几代没什么太大关系的!估计就是卖你菌种那个错了!让他给你换!

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10楼2016-11-16 12:58:39
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