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新虫 (小有名气)

[交流] 细胞培养常用试剂

(1)高糖DMEM溶液
用新配制的三蒸水配制,高糖DMEM干粉(规格10×1L),溶入约总量的1/3的三蒸水,并用水洗净包装袋,在磁力搅拌器上搅拌30分钟,加入NaHCO2 3.75克,补加水至最终量。用1N HCL调整PH为7.2,0.22μm滤膜抽滤除菌,分装-20℃保存,使用时加10%的胎牛血清及双抗溶液(最终浓度:青霉素100U/ml,链霉素 100μg/ml)

(2) 胎牛血清
使用前56℃水浴30分钟灭活,无菌条件下分装成10ml包装,-20℃保存。用时以10%浓度注入培养液中。

(3) 青霉素、链霉素双抗溶液
青霉素100万单位及硫酸链霉素1g无菌条件下溶于消毒三蒸水10ml,分装,-20℃保存。使用时每1000ml培养液加入青、链霉素混合液1ml,最终浓度为青霉素100单位/ml,链霉素100μg/ml。

(4)磷酸盐溶液(PBS):
NaCl 8g, KCl 0.4g, NaHPO4.H2O 1.15g KH2PO4 0.2g 分别溶于1000ml三蒸水中,调节PH值至7.4高压蒸气灭菌,分装后4℃保存。

(5)胰蛋白酶溶液
用三蒸水制备成0.25%浓度,0.22μm滤膜抽滤除菌,4℃保存。

(6)0.1%明胶溶液
称取明胶粉剂0.1g于烧杯中,加入三蒸水100mL于50℃充分搅拌至其完全溶解,0.22μm滤膜抽滤除菌,4℃保存
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