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求助 M15蛋白表达量很低 已有5人参与
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大家好，最近在表达蛋白，载体是pQE-9,表达的菌株是E.coliM15,蛋白的分子大约在23kd，我是用之前保存的甘油菌，甘油菌也是最近保存的，先用37度，150rpm/min摇菌一夜，第二天早上1：30扩大的，等吸光度达到0.6-0.8时加IPTG进行诱导，之后30度，200rpm/min诱导6h,收菌后用超声波破碎的。这个步骤是之前师姐摸索的，但我最近做的时 候发现表达量相较师姐的低很多，想求助各位大神，帮帮我，谢谢 |
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ganchao1776
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2楼2016-11-12 08:03:59
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4楼2016-11-14 06:24:47
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-14 07:40:48
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建议重新用重组质粒转化挑单菌落做，用保存的甘油菌确实会表达量降低的，这个是有文献报道的 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-11-14 07:33:48
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