| 查看: 1037 | 回复: 5 | |||
[交流]
求助 M15蛋白表达量很低 已有5人参与
|
大家好,最近在表达蛋白,载体是pQE-9,表达的菌株是E.coliM15,蛋白的分子大约在23kd,我是用之前保存的甘油菌,甘油菌也是最近保存的,先用37度,150rpm/min摇菌一夜,第二天早上1:30扩大的,等吸光度达到0.6-0.8时加IPTG进行诱导,之后30度,200rpm/min诱导6h,收菌后用超声波破碎的。这个步骤是之前师姐摸索的,但我最近做的时 候发现表达量相较师姐的低很多,想求助各位大神,帮帮我,谢谢 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线:以精准检测,护健康基石
已经有0人回复
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有240人回复
不合理蛙科研实验中的趣事:实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
不合理蛙科研实验中的趣事:和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
蛋白质检测:精准分析,解锁生物分子的密码
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之小鼠实验:严谨设计,解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之重金属检测:精准筛查,守护健康与环境的防线
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
ganchao1776
至尊木虫 (职业作家)
- MolEPI: 12
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 11174.1
- 散金: 1811
- 红花: 30
- 帖子: 3390
- 在线: 900.6小时
- 虫号: 330935
- 注册: 2007-03-24
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2016-11-12 08:03:59
3楼2016-11-12 09:00:52
wlt728
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 38 (小学生)
- 金币: 13652.1
- 散金: 977
- 红花: 5
- 沙发: 1
- 帖子: 2130
- 在线: 344.5小时
- 虫号: 275024
- 注册: 2006-08-27
- 专业: 抗体工程学

4楼2016-11-14 06:24:47
baishaoyun
新虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2468
- 红花: 2
- 帖子: 109
- 在线: 17.2小时
- 虫号: 4169195
- 注册: 2015-10-23
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤(含特殊感受
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-14 07:40:48
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-14 07:40:48
|
建议重新用重组质粒转化挑单菌落做,用保存的甘油菌确实会表达量降低的,这个是有文献报道的 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-11-14 07:33:48
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能

6楼2016-11-14 08:07:28












候发现表达量相较师姐的低很多,想求助各位大神,帮帮我,谢谢
回复此楼