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duowan17

金虫 (正式写手)

[求助] 乙醇沉淀 已有1人参与

我用60%乙醇沉淀蛋白,沉淀后有很多蛋白不能复溶,是蛋白变性了吗?复溶一次后,继续加入缓冲液,复溶的上清中依旧有蛋白溶出,再复溶,情况还是类似,依旧有蛋白溶出,什么情况啊?有没有大神指点迷津。
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
每个蛋白的性质不一样,因为有部分蛋白醇沉时已经变性。
2楼2016-11-14 10:43:27
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duowan17

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2016-11-14 10:43:27
每个蛋白的性质不一样,因为有部分蛋白醇沉时已经变性。

你好,我用20%的乙醇沉淀,依旧有沉淀不溶。SDS-PAGE检测沉淀中含有目的蛋白,是说这个蛋白对乙醇敏感吗?
3楼2016-11-16 11:32:42
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duowan17

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2016-11-14 10:43:27
每个蛋白的性质不一样,因为有部分蛋白醇沉时已经变性。

还有就是,为什么第二次,甚至第三次复溶依旧有目的蛋白复溶于上清中?
4楼2016-11-16 11:33:55
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