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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » western bloting 分离胶
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曹星辰

新虫 (初入文坛)

[求助] western bloting 分离胶 已有3人参与

12%的分离胶总是出现气泡，有虫友出现这种情况吗？求指导……

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1楼 2016-11-09 12:35:58
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来LWM

新虫 (初入文坛)
如果是配胶混匀的时候出气泡，那就操作小心点，如果瘦是打胶的时候出气泡，一般没影响，因为上层封水时，气泡会浮上来的

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2楼2016-11-10 09:27:02
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匿名

感谢参与，应助指数 +1
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3楼2016-11-10 11:18:41
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天地一微尘

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、灌胶前将胶板洗干净，配制胶时充分混匀。
2、灌胶时缓慢进行。
3、灌完分离胶后，加水或异丙醇封闭时，轻轻注入不要将胶冲起。
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4楼2016-11-10 14:36:53
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lakecc1

木虫 (正式写手)
吸的时候从底部吸，往胶板中打的时候从侧边角慢慢打，最后枪头中留一点，不要打完

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5楼2016-11-11 15:40:36
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lx星尚红果

新虫 (初入文坛)
把胶打到高板上，让它自己流下去就几乎没泡

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6楼2016-11-14 00:18:22
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kunkuncow

新虫 (小有名气)
用1ml的枪沿着内壁缓慢滴加

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7楼2016-11-14 06:58:23
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刘杨震宇

新虫 (初入文坛)
1.板子一定要清洗干净
2.配胶时轻摇混匀，尽量不要摇出气泡
3.灌胶时沿着侧边缓慢灌注，可轻轻敲击板子，使气泡漂浮起来。
4.加水或者异丙醇压胶。

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8楼2016-11-14 09:59:16
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L_Hunter

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

倒掉封闭液用滤纸吸干封闭液的时候，如果滤纸碰到了分离胶，会使分离胶形变而在分离胶和玻璃板间进入空气形成气泡，你看一下气泡是不是出现在分离胶和玻璃板之间，如果是的话应该就是这个问题
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9楼2016-11-30 17:00:18
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小芙蝶

新虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 曹星辰 at 2016-11-09 12:35:58
12%的分离胶总是出现气泡，有虫友出现这种情况吗？求指导……

是加SDS的原因吗?

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10楼2017-03-12 19:59:19
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