24小时热门版块排行榜    

查看: 1489  |  回复: 16

五羊齐天

金虫 (小有名气)

研究僧

[交流] 电泳时上样孔滞留蛋白

最近做WB时刚电泳十几分钟时候,总是有蛋白滞留在上样孔底部,后来就压缩没有了,结果发光出来的条带(90kd)严重拖尾,哪位大神遇到过类似问题,还望不吝指教!

电泳时上样孔滞留蛋白
2016_10_25_12_35_281477370128373.jpg


电泳时上样孔滞留蛋白-1
2016_10_25_12_36_201477370180260.jpg


电泳时上样孔滞留蛋白-2
86680879.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

五羊齐天

金虫 (小有名气)

研究僧

引用回帖:
3楼: Originally posted by 韩晓兔 at 2016-11-08 09:11:16
蛋白上样缓冲液有没有问题啊,我上次配缓冲液的时候甘油加的少了,样品就飘的沉不下来。

蛋白上样缓冲液是买的,之前也怀疑是不是我用的那一瓶出了问题,结果换其他的缓冲液做了对比试验,都是这样的结果
4楼2016-11-08 13:51:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

田生帅菜

新虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-08 09:21:44
五羊齐天: 金币+1 2016-11-08 13:50:06
最后的图是WB结果吗?如果时那结果还不错。个人觉得可能是样品煮的不透,再煮沸10分钟,然后离心12000转2min,再上样试试吧!

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-11-07 23:39:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

韩晓兔

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-11-08 09:21:55
五羊齐天: 金币+1 2016-11-08 13:50:10
蛋白上样缓冲液有没有问题啊,我上次配缓冲液的时候甘油加的少了,样品就飘的沉不下来。
3楼2016-11-08 09:11:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

五羊齐天

金虫 (小有名气)

研究僧

引用回帖:
2楼: Originally posted by 田生帅菜 at 2016-11-07 23:39:32
最后的图是WB结果吗?如果时那结果还不错。个人觉得可能是样品煮的不透,再煮沸10分钟,然后离心12000转2min,再上样试试吧!

结果真心不行,做了好多次90KD的条带都是拖尾的。煮样品是在那种插孔机器里100度5min,不知道是不是那里出了问题,下次换沸水煮一下试试
5楼2016-11-08 13:53:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

田生帅菜

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 五羊齐天 at 2016-11-08 13:53:55
结果真心不行,做了好多次90KD的条带都是拖尾的。煮样品是在那种插孔机器里100度5min,不知道是不是那里出了问题,下次换沸水煮一下试试...

你说的那个是金属浴吧?多煮煮,你煮的时间太短了

发自小木虫IOS客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2016-11-08 14:07:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
五羊齐天: 金币+1 2016-11-08 14:33:29
可能是 蛋白煮沸时间不够。有部分没完全变性

发自小木虫IOS客户端
7楼2016-11-08 14:08:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ylz2433

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
蛋白里的盐浓度高吗?
努力,加油!
8楼2016-11-08 14:23:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

五羊齐天

金虫 (小有名气)

研究僧

引用回帖:
6楼: Originally posted by 田生帅菜 at 2016-11-08 14:07:17
你说的那个是金属浴吧?多煮煮,你煮的时间太短了
...

好的,谢啦!
9楼2016-11-08 14:33:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

五羊齐天

金虫 (小有名气)

研究僧

引用回帖:
8楼: Originally posted by ylz2433 at 2016-11-08 14:23:53
蛋白里的盐浓度高吗?

不知道这个,也没测过
10楼2016-11-08 14:33:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 五羊齐天 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:47 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:46 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 5/250 2026-02-08 08:32 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:27 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:07 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 08:06 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:52 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:46 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:32 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:07 by vs90ilomwc
[硕博家园] 博士延得我,科研能力直往上蹿 +8 偏振片 2026-02-02 8/400 2026-02-08 06:52 by liyeqik
[教师之家] 有院领导为了换新车,用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生|MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
请填处理意见