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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » AKTA的U280吸收值怎么换算成样品浓度
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)

[求助] AKTA的U280吸收值怎么换算成样品浓度 已有4人参与

请问：AKTA的U280吸收值怎么换算成样品浓度？
举个例子就行。
我是小白
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只有拼出来的美丽，没有等出来的辉煌！
1楼 2016-11-07 17:01:34
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)
没人么
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只有拼出来的美丽，没有等出来的辉煌！
2楼2016-11-07 19:39:12
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)
why
3楼2016-11-08 08:39:33
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不能蛋白不一样，UV值可以标定的，你取个已经浓度的蛋白，过下，看uv值，做个曲线出来，计算下就知道了。
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4楼2016-11-08 10:43:02
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果知道蛋白序列的话，应用DNAstar之类的软件可以计算出消光系数，280的吸光度值通过消光系数可以转换成浓度，如图 1A=0.85mg/ml
AKTA的U280吸收值怎么换算成样品浓度
消光系数.png
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zxldbnydx
5楼2016-11-10 13:23:52
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by yyy0305 at 2016-11-10 13:23:52
如果知道蛋白序列的话，应用DNAstar之类的软件可以计算出消光系数，280的吸光度值通过消光系数可以转换成浓度，如图 1A=0.85mg/ml

消光系数.png
...

虽说不太懂，还是谢谢
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只有拼出来的美丽，没有等出来的辉煌！
6楼2016-11-10 17:00:09
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2016-11-08 10:43:02
不能蛋白不一样，UV值可以标定的，你取个已经浓度的蛋白，过下，看uv值，做个曲线出来，计算下就知道了。

谢谢
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只有拼出来的美丽，没有等出来的辉煌！
7楼2016-11-10 17:00:16
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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家

【答案】应助回帖

测该样品的多个已知浓度的U280，然后做该样品浓度和U280的标准曲线，用excl做，可以得出标准曲线方程，方程的R平方也就是相关系数0.99以上认为是相关的。然后你再测你的样品的U280，带入你的标准曲线方程计算浓度。
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8楼2016-11-15 14:30:22
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kevinlau1990

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

U280其实并不能测样品浓度，但是可以通过公式计算出大概的浓度，因为是实时监测的，你可以利用软件粗略估出总的蛋白量然后计算，精确的样品浓度还是需要进行BCA或者BRADFORD进行确定。
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9楼2016-11-18 09:32:53
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