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zxldbnydx

金虫 (小有名气)

[求助] AKTA的U280吸收值怎么换算成样品浓度 已有4人参与

请问:AKTA的U280吸收值怎么换算成样品浓度?
举个例子就行。
我是小白
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只有拼出来的美丽,没有等出来的辉煌!
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)

只有拼出来的美丽,没有等出来的辉煌!
2楼2016-11-07 19:39:12
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)

why
3楼2016-11-08 08:39:33
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不能蛋白不一样,UV值可以标定的,你取个已经浓度的蛋白,过下,看uv值,做个曲线出来,计算下就知道了。
4楼2016-11-08 10:43:02
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果知道蛋白序列的话,应用DNAstar之类的软件可以计算出消光系数,280的吸光度值通过消光系数可以转换成浓度,如图 1A=0.85mg/ml
AKTA的U280吸收值怎么换算成样品浓度
消光系数.png

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2016-11-10 13:23:52
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by yyy0305 at 2016-11-10 13:23:52
如果知道蛋白序列的话,应用DNAstar之类的软件可以计算出消光系数,280的吸光度值通过消光系数可以转换成浓度,如图 1A=0.85mg/ml

消光系数.png
...

虽说不太懂,还是谢谢
只有拼出来的美丽,没有等出来的辉煌!
6楼2016-11-10 17:00:09
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zxldbnydx

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2016-11-08 10:43:02
不能蛋白不一样,UV值可以标定的,你取个已经浓度的蛋白,过下,看uv值,做个曲线出来,计算下就知道了。

谢谢
只有拼出来的美丽,没有等出来的辉煌!
7楼2016-11-10 17:00:16
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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家


【答案】应助回帖

测该样品的多个已知浓度的U280,然后做该样品浓度和U280的标准曲线,用excl做,可以得出标准曲线方程,方程的R平方也就是相关系数0.99以上认为是相关的。然后你再测你的样品的U280,带入你的标准曲线方程计算浓度。
8楼2016-11-15 14:30:22
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kevinlau1990

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

U280其实并不能测样品浓度,但是可以通过公式计算出大概的浓度,因为是实时监测的,你可以利用软件粗略估出总的蛋白量然后计算,精确的样品浓度还是需要进行BCA或者BRADFORD进行确定。
9楼2016-11-18 09:32:53
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